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在前一篇文章《单细胞测序分析(五)降维聚类&数据整合》中,我们深入探讨了单细胞RNA测序数据的降维聚类方法,以及如何整合不同实验或数据来源的数据,为后续分析提供了坚实的基础。本期,我们将进一步走进单细胞数据分析的另一个关键步骤——过滤双细胞。
什么是双细胞?
在单细胞RNA测序中,我们希望对每个单独的细胞进行测序分析。然而,在样本制备过程中,可能会出现多个细胞聚集在一起的现象,形成所谓的“双细胞”或“多细胞”。双胞的存在可能会对下游分析(如聚类、差异表达等)产生误导,因此在分析过程中识别和过滤双胞是一个重要的步骤。
为什么需要过滤双细胞?
双细胞会导致以下几个问题:
数据误差:两个细胞的基因表达信号混合,结果可能不代表任何一个单独细胞的真实情况。
降维聚类干扰:在降维和聚类分析中,双细胞的表达信息不稳定,会影响聚类结果,进而影响后续的细胞类型注释和功能分析。
增加噪音:双细胞会带来不必要的噪音,影响数据的清晰度和分析的精确度。
DoubletFinder 是一个用于在单细胞 RNA-seq 数据中检测双胞(doublets)的 R 包。它基于 Seurat 对象进行分析,并使用最近邻图(KNN)来识别潜在的双胞。以下是如何在 Seurat 对象 seob 上使用 DoubletFinder 的详细步骤。



