2022-08-10 当你细胞污染时,先不要找自己的原因

  1. 多找别人的原因
    细胞老是污染,当然是要先找冻存液(刘师姐遇到过),培养皿(更换后就没事了),离心管(有人为了钓鱼,故意打开又放回去)。原因太多了,先把这些外在原因考虑一遍,再考虑自己的原因。

  2. 不管是所谓的细菌,真菌,还是支原体,都是没有做好无菌原则。
    遇到细胞污染后,和细胞培养相关的所有东西,比如培养基,胰酶,离心管等都要全部换一遍。
    我自己是4种细胞,三种培养基,我自己养细胞有一个习惯,我是按照细胞种类进行准备东西的,比如293T和Cal27细胞都是用DMEM养,我还是准备两管DMEM培养基,胰酶等。从上周开始,细胞复苏时候还是可以的,只要消化扩大培养就污染,而且所有细胞种类几乎都污染了一遍。我把所用的东西全部换了一遍,一样的,复苏后48h,没有问题,扩大一下就污染。

  3. 这个中间一定是有一个系统问题没有解决?
    毕竟我没有

  • 不带手套,不开吹风的,就打开细胞台子(小台子是需要手动打开电源才能吹风的)里面的装PBS的瓶子,拿着从外面带进细胞房的50ml离心管
  • 毕竟,我没有重感冒,连打喷嚏,还不带口罩
  • 我没有打开培养箱的门时候,打喷嚏,不戴口罩
  • 毕竟我没有一副手套可以用两个月那种

我做实验以前也是不戴口罩,然后去13楼找泉哥和恺神吃饭的时候,我发现他们从细胞房出来都是带着口罩的,我觉得这个习惯蛮好,所有后来我进细胞房也都戴口罩了。
我自己的手心容易出汗,直接带橡胶手套,汗液容易使得手套变黄,用了一次就会很难看,所有我都是先带一层薄膜手套,再带橡胶手套,这样外面手套一般用5到7天,就会更换新的。
移液器的问题,这学期移液器坏了很多把,我之前发过帖子,主要是容易倒吸,为了避免细胞污染,我自己在淘宝上购买了一把大龙的移液器,基本不会倒吸。
即使是这样,我的细胞还是轮着法的污染。我回想的在一个晚上,(因为白天不知道干啥去了,)当时细胞房紫外灯都照上了,我就关了细胞房紫外关了,直接打开超净台就开始做细胞实验。第二天就陆陆续续出现污染的情况。
因为我们这边的习惯,做完实验以后就把超净台照上紫外,下一个人如果看到超净台紫外关闭,说明消毒完成可以直接使用。
如果是不是亲眼所见,我是万万没想到一个人做完细胞以后直接合上,就走了
我看到大师姐和师弟他们每次做细胞实验前,都是在紫外灯关闭状态(以前,我认为消毒完成的装药),把自己的东西(比如带着塑料袋的培养皿,离心管)拿进去照才开始做实验。我觉得他们多次一举,而且紫外灯相当于多多工作一倍时间,也是浪费。
万万没想到,他们是对的,我是错的,而且绝不是多此一举和浪费紫外,因为污染了以后,又是好几天时间,耗不起。

  1. 最后
    最后也没有答案,做好自己细胞。
    不要以为我守规矩,别人也能一样做到。
    too young,too naive

(20220810 吐槽贴,不敢在公众号发,这里知道的人少就来这里发)

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