转膜犹如赶电流

转膜简单来说:把SDS-PAGE凝胶里的蛋白,把电流“赶”到膜上(PVDF/NC膜)并固定下来。

1.带电迁移

蛋白在SDS包裹下,带均一的负电荷,通电后,蛋白从负极往正极方向移动。

2.筛选与吸附

蛋白从凝胶中“挤出来”,并被膜(PVDF/NC)吸附固定。

膜表面带有 疏水作用 + 静电吸附力。

3.蛋白固定在膜上,不再流动

为后续抗体结合准备“舞台”。

转膜的结构(从阴极到阳极)

(-) 黑色 → 海绵 / 滤纸 / 凝胶 / 膜(PVDF或NC) / 滤纸 / 海绵 → 红色 (+)

4针对转膜存在的症状 以及可能原因 

| 无条带  | 转膜方向错 / 气泡 / 未活化膜 |

| 条带浅  | 转膜不足 / 蛋白量少      |

| 高背景  | 封闭不充分 / 抗体浓度太高    |

| 小蛋白消失 | **过转**(吹膜现象)      |

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