产品概述
本品为艾美捷Bethyl Laboratories推出的兔源抗QKI多克隆抗体（货号：A300-183A），采用表位特异性亲和纯化工艺制备，以完整IgG形式提供。该抗体针对人QKI异构体5的C端区域（第291位氨基酸至C末端）设计，能够特异性识别异构体5，而与其他7种已知QKI异构体（1、2、3、4、6、7、7B）无交叉反应。这一独特的异构体选择性使其成为研究QKI异构体特异性功能的理想工具。
QKI（quaking homolog，KH结构域RNA结合蛋白）是一种RNA结合蛋白和翻译抑制因子，在胚胎发育、髓鞘形成、少突胶质细胞分化及前体mRNA剪接调控中发挥关键作用。QKI已被确认为精神分裂症的候选基因，同时在多种神经系统疾病及肿瘤中具有重要研究价值。
核心规格参数
参数 | 具体信息
靶标 | QKI（异构体5）
反应种属 | 小鼠、人
应用 | IHC、IP、WB
宿主 | 兔
克隆性 | 多克隆
抗体形式 | 完整IgG
免疫原 | 异构体5的第291位至C末端
亚型 | IgG
标记物 | 未偶联
纯度 | 抗原亲和纯化
抗原种属 | 人
浓度 | 1000 µg/ml（1 mg/ml）
储存 | 2 8 °C
有效期 | 自收货之日起1年
缓冲液 | Tris-柠檬酸盐/磷酸盐缓冲液，pH 7-8，含0.09%叠氮化钠
储存与稳定性
储存温度：2 8 °C
有效期：1年
缓冲体系：Tris-柠檬酸盐/磷酸盐缓冲液（pH 7-8），含0.09%叠氮化钠
叠氮化钠作为防腐剂存在。在使用HRP标记二抗进行检测时，需注意叠氮化钠对过氧化物酶的抑制作用。如需进行细胞活性实验或去除叠氮化钠，可通过透析或超滤换液。
本抗体采用了表位特异性亲和纯化工艺：
亲和纯化：抗血清通过固相载体上固定的特异性表位进行亲和层析纯化。所使用的表位对应人quaking homolog异构体5的C端区域（参考序列AAH19917.1，GeneID 9444），具体位于第291位氨基酸至C末端之间。
异构体选择性验证：经表位序列比对验证，该抗体识别的表位仅存在于异构体5中，在以下异构体中均不存在：
异构体1、2、3、4、6、7、7B（对应TrEMBL条目Q9P0Y1、Q9P0Y0、Q9P0X6、Q9P0X8、Q96PU7、Q969L9、Q96PU6）
这一特性是本产品的核心功能优势——能够从多种QKI异构体中特异性检测异构体5，而不受其他异构体的干扰。
浓度测定：免疫球蛋白浓度依据比尔定律测定，设定条件为1 mg/ml IgG在280 nm波长处吸光值为1.4。
推荐应用与稀释度
以下为经过验证或推荐的应用条件：
应用类型 | 推荐稀释度/用量 | 关键条件
免疫组织化学（IHC） | 1:500 1:2,000 | 推荐使用Tris-EDTA pH 9.0进行抗原修复（FFPE切片）
免疫沉淀（IP） | 6 µg/mg裂解物 | 每毫克总蛋白裂解液使用6 µg抗体
蛋白质印迹（WB） | 1:5,000 1:25,000 | 5% Milk-TBST封闭和稀释，一抗孵育过夜
QKI生物学功能
QKI属于STAR（信号转导和RNA激活）家族成员，包含一个KH结构域，能够结合RNA序列“ACUAA”。其主要功能包括：
1. 前体mRNA剪接调控：QKI与剪接因子相互作用，调节多种靶基因的可变剪接事件
2. mRNA稳定性调控：结合靶mRNA的3‘UTR，影响其降解或翻译效率
3. 翻译抑制：作为翻译抑制因子，负调控特定蛋白的合成
在少突胶质细胞分化过程中，QKI通过调控髓鞘碱性蛋白（MBP）等基因的表达，对髓鞘形成至关重要。QKI敲除小鼠表现出广泛的髓鞘发育缺陷和围产期致死。
异构体5的特殊性
人QKI基因通过可变剪接产生至少8种异构体。异构体5（又称QKI-5）主要定位于细胞核，参与前体mRNA的加工和剪接调控；而异构体6、7等主要定位于细胞质，调控mRNA稳定性和翻译。研究QKI-5的特异性功能需要能够区分异构体5与其他剪接变体的抗体工具——这正是本产品的核心价值所在。
常见问题与解决方案
问题 | 可能原因 | 建议措施
WB出现多条非预期条带 | 识别了其他QKI异构体（但理论不应发生）或非特异性结合 | 验证细胞系中QKI异构体表达谱；提高一抗稀释度至1:20,000；使用封闭肽作吸附对照
WB中约55 kDa处有条带 | 免疫沉淀产物检测时使用了抗H+L二抗 | IP产物检测必须更换为抗兔IgG轻链HRP二抗，并添加5%正常猪血清
IHC无信号或弱信号 | 抗原修复条件不佳 | 确保使用Tris-EDTA pH 9.0，延长修复时间（微波高火10分钟+低火10分钟）
IP拉下效率低 | 抗体用量不足或裂解液中QKI含量低 | 增加抗体至10 µg/mg裂解物；使用过表达QKI-5的细胞裂解液作为阳性对照
小鼠样本信号弱 | 种属反应性为小鼠，但亲和力可能低于人 | 尝试降低稀释度（如WB 1:5,000起始），延长孵育时间
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