腺病毒载体使用指南:什么情况下优先用它做基因递送?

腺病毒载体能感染分裂和非分裂细胞。它适用于体内和体外基因传递,转染效率高,对外源基因瞬时表达量高。但相对于其他病毒载体系统,腺病毒载体在靶细胞中具有相对较高的免疫原性。您应考虑以下几点:

(1)外源基因需要瞬时表达还是稳定的基因表达

(2)需转染分裂细胞还是非分裂的细胞

(3)对于靶细胞的潜在免疫原性是否有充分的了解

(4)病毒用来进行体内还是体外基因传递

当有以下实验要求时,可以考虑使用腺病毒替代慢病毒:

① 需缩短实验周期

慢病毒感染效率约 70% 左右,不能直接进行后续实验,需筛选稳定细胞株,而筛选时间至少为两周。腺病毒感染效率高,在很多细胞株中的效率可以达到 99%,可直接进行后续实验,节约经济成本和时间成本。

② 需进行动物实验

用于动物实验的病毒需具有较高的滴度,才能达到使用小体积注射的目的。以注射 108 病毒颗粒数为例,目前,慢病毒能达到的高效滴度通常在 10^8 TU/mL 左右,如选用慢病毒约需 1 mL 病毒注射体积,大体积的病毒量对于动物是有害的,尤其是注射脑部。腺病毒的滴度可达 10^11 PFU/mL,应用于动物实验时,每只小鼠只需要 1 μL,而每只大鼠 10 μL 既可。

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