这里是佳奥!我们又开始了新的分析流程学习。
与ChIP-Seq相似,ATAC-Seq也是通过染色质片段来进行表观相关的分析。
我们先来看一下分析流程吧。
1 数据分析概述
1.1 原始数据质控
Trim galore
去除线粒体、PCR重复。
1.2 ATAC-Seq数据质量评估
ChIPQC:一个R包,可以给出多个质量评估度量值
IDR: 样本内的重复性检测,合并一致性peaks
1.3 注意基因组的黑名单(重复序列,微卫星序列)
1.4 call peaks注意
ATAC-Seq关心的是在哪切断,断点才是peak的中心,所以使用shift模型,--shift -75或-100
1.5 peaks相关
DiffBind:一个R包,基于DESeq2、edgeR方法鉴定样本间的差异peak
注释:Y叔的ChIPseeker 包
motif分析:Homer,Meme等在线工具
2 分析流程软件
sra-tools
fastqc,multiqc,trim_galore
参考基因组及注释文件: https://www.encodeproject.org/references/ENCSR425FOI/
bowtie,bowtie2,bwa,注意参数
MACS2,注意参数
可重复性统计指标https://www.encodeproject.org/atac-seq/
deeptools
meme/homer motif
annotation(R包,ChlPpeakAnno, ChIPseeker)
下一篇我们开始复现文章数据的实战学习。
我们下一篇再见!