NCI-H2170细胞培养注意事项
1. 贴壁较慢
传代或复苏之后,NCI-H2170细胞需要较长时间才能完全贴壁。起初细胞可能成簇贴壁,随着培养细胞会慢慢铺展开形成单层细胞。建议将细胞接种至培养器皿后,放进培养箱耐心等待48小时再拿出培养瓶观察,更有利于细胞贴壁。
2. 细胞呈岛状/片状生长
这是NCI-H2170细胞的特性,是正常现象,并不是细胞发生“聚团”,无需担心。细胞间连接紧密,在70%~80%密度时细胞实际数量其实很大,此时需要传代。
3. 细胞生长较慢
80%密度1:2传代的情况下,传代周期为6天左右,需耐心培养。维持2-3天换液一次,少观察少操作,保持细胞生长环境稳定。建议每次传代按1:2传,接种密度不可过低。
4. 存在漂浮细胞
NCI-H2170细胞培养时存在部分漂浮的细胞是正常现象,不影响贴壁细胞生长。复苏和传代初期,漂浮的细胞可能较多,培养过程中也会存在漂浮细胞,当贴壁细胞密度较低时,应该在换液时将漂浮细胞离心收集并接种回原瓶,这些漂浮细胞仍有可能贴壁。当贴壁细胞较多时,漂浮细胞可以舍弃。
5. 黑点较多
NCI-H2170细胞培养时背景中可能有较多黑点,为细胞代谢产物和细胞碎片,不影响细胞生长。若黑点较多可以在换液时用预热的PBS轻轻润洗。