DNA测序数据的获取,质控和格式转换

Aspera及SRAToolkit的安装运行

一:Aspera的安装
1.建立安装文件夹

mkdir ~/Biosofts
cd ~/Biosofts

2.下载源代码
wget https://download.asperasoft.com/download/sw/connect/3.6.2/aspera-connect-3.6.2.117442-linux-64.tar.gz
3.解压
tar zvxf aspera-connect-3.6.2.117442-linux-64.tar.gz
4.加入shell脚本
sh aspera-connect-3.6.2.117442-linux-64.sh
5.测试Aspera是否安装成功
~/.aspera/connect/bin/ascp -h

5.png

6.配置环境变量
echo 'export PATH=~/.aspera/connect/bin:$PATH' >> ~/.bashrc
source ~/.bashrc
7.测试Aspera路径是否成功加入环境变量
ascp -h

6.png

二:SRAToolkit的安装
1.下载源代码到Biosofts
wget -P ~/Biosofts/ https://ftp-trace.ncbi.nlm.nih.gov/sra/sdk/2.9.2/sratoolkit.2.9.2-ubuntu64.tar.gz
2.解压
tar zvxf ~/Seqs/sratoolkit.2.9.2-ubuntu64.tar.gz -C ~/Biosofts
3.测试安装是否成功
~/Biosofts/sratoolkit.2.9.2-ubuntu64/bin/fastq-dump -h

8.png

4.配置环境变量
echo 'export PATH=~/Biosofts/sratoolkit.2.9.2-ubuntu64/bin:$PATH' >> ~/.bashrc
source ~/.bashrc
5.再次测试安装是否成功
fastq-dump

7.png

三:Aspera下载SRA文件
1.建立Seqs文件夹保存下载序列
mkdir ~/Seqs
2.下载SRA文件到Seqs文件夹
ascp -T -i /home/huangxun/.aspera/connect/etc/asperaweb_id_dsa.openssh -k 1 -l 200m anonftp@ftp-private.ncbi.nlm.nih.gov:/sra/sra-instant/reads/ByRun/sra/SRR/SRR620/SRR6208854/SRR6208854.sra ~/Seqs/

1.png

这个失败了,但是perfetch能成功,
还可以从ENA数据库下载
ascp -P 33001 -k 1 -l 200m -T -i ~/.aspera/connect/etc/asperaweb_id_dsa.openssh era-fasp@fasp.sra.ebi.ac.uk:/vol1/fastq/SRR620/004/SRR6208854/SRR6208854.fastq.gz ./
12.png

3.批量下载
nano ~/Seqs/sra_list.txt
/sra/sra-instant/reads/ByRun/sra/SRR/SRR623/SRR6232298/SRR6232298.sra
/sra/sra-instant/reads/ByRun/sra/SRR/SRR623/SRR6232299/SRR6232299.sra
按ctrl+x保存退出
4.批量下载sra_list.txt列表中的文件
ascp -T -i /home/huangxun/.aspera/connect/etc/asperaweb_id_dsa.openssh -k 1 -l 200m --mode recv --host ftp-private.ncbi.nlm.nih.gov --user anonftp --file-list ~/Seqs/sra_list.txt ~/Seqs/

2.png

这个也失败了

四:prefetch命令下载SRA文件
1.下载单个文件
prefetch SRR6232298

11.png

2.下载多个文件
prefetch --option-file Seqs/SRR_lists.txt

3.png

五:解压SRA文件
1.解压为gz文件,节省空间
fastq-dump --split-files ~/ncbi/public/sra/SRR6232298.sra

4.png

2.批量解压

#!/bin/sh
for i in *sra
do
echo $i
fastq-dump --gzip --split-files $i
done

Fastqc安装及运行

一:java环境安装
1.建立/usr/java目录
sudo mkdir /usr/java
2.解压
sudo tar -zvxf ~/Biosofts/jdk-8u172-linux-x64.tar.gz -C /usr/java/
3.相关目录建立软连接

sudo cd /usr/java
sudo ln -s jdk1.8.0_172 latest
sudo ln -s /usr/java/latest default

4.配置环境变量

sudo echo 'export PATH=$JAVA_HOME/bin:$JAVA_HOME/jre/bin:$PATH'>> /etc/profile
sudo echo 'export CLASSPATH=.:$JAVA_HOME/lib/dt.jar:$JAVA_HOME/lib/tools.jar'>> /etc/profile
source /etc/profile

5.测试是否安装成功
java -version

9.png

二:fastqc安装
1.创建安装文件夹
cd ~/Biosofts
2.下载
wegt http://www.bioinformatics.babraham.ac.uk/projects/fastqc/fastqc_v0.11.7.zip
3.建立子目录
mkdir ~/Biosofts/fastqc
4.解压
unzip ~/Biosofts/fastqc_v0.11.7.zip -d ~/Biosofts/
chmod +x ~/Biosofts/FastQC/fastqc
~/Biosofts/FastQC/fastqc -h
5.配置环境变量
echo 'export PATH=~/Biosofts/FastQC:$PATH'>>~/.bashrc
source ~/.bashrc
6.检测是否安装成功
fastqc -h

10.png

最后编辑于
©著作权归作者所有,转载或内容合作请联系作者
  • 序言:七十年代末,一起剥皮案震惊了整个滨河市,随后出现的几起案子,更是在滨河造成了极大的恐慌,老刑警刘岩,带你破解...
    沈念sama阅读 219,635评论 6 508
  • 序言:滨河连续发生了三起死亡事件,死亡现场离奇诡异,居然都是意外死亡,警方通过查阅死者的电脑和手机,发现死者居然都...
    沈念sama阅读 93,628评论 3 396
  • 文/潘晓璐 我一进店门,熙熙楼的掌柜王于贵愁眉苦脸地迎上来,“玉大人,你说我怎么就摊上这事。” “怎么了?”我有些...
    开封第一讲书人阅读 165,971评论 0 356
  • 文/不坏的土叔 我叫张陵,是天一观的道长。 经常有香客问我,道长,这世上最难降的妖魔是什么? 我笑而不...
    开封第一讲书人阅读 58,986评论 1 295
  • 正文 为了忘掉前任,我火速办了婚礼,结果婚礼上,老公的妹妹穿的比我还像新娘。我一直安慰自己,他们只是感情好,可当我...
    茶点故事阅读 68,006评论 6 394
  • 文/花漫 我一把揭开白布。 她就那样静静地躺着,像睡着了一般。 火红的嫁衣衬着肌肤如雪。 梳的纹丝不乱的头发上,一...
    开封第一讲书人阅读 51,784评论 1 307
  • 那天,我揣着相机与录音,去河边找鬼。 笑死,一个胖子当着我的面吹牛,可吹牛的内容都是我干的。 我是一名探鬼主播,决...
    沈念sama阅读 40,475评论 3 420
  • 文/苍兰香墨 我猛地睁开眼,长吁一口气:“原来是场噩梦啊……” “哼!你这毒妇竟也来了?” 一声冷哼从身侧响起,我...
    开封第一讲书人阅读 39,364评论 0 276
  • 序言:老挝万荣一对情侣失踪,失踪者是张志新(化名)和其女友刘颖,没想到半个月后,有当地人在树林里发现了一具尸体,经...
    沈念sama阅读 45,860评论 1 317
  • 正文 独居荒郊野岭守林人离奇死亡,尸身上长有42处带血的脓包…… 初始之章·张勋 以下内容为张勋视角 年9月15日...
    茶点故事阅读 38,008评论 3 338
  • 正文 我和宋清朗相恋三年,在试婚纱的时候发现自己被绿了。 大学时的朋友给我发了我未婚夫和他白月光在一起吃饭的照片。...
    茶点故事阅读 40,152评论 1 351
  • 序言:一个原本活蹦乱跳的男人离奇死亡,死状恐怖,灵堂内的尸体忽然破棺而出,到底是诈尸还是另有隐情,我是刑警宁泽,带...
    沈念sama阅读 35,829评论 5 346
  • 正文 年R本政府宣布,位于F岛的核电站,受9级特大地震影响,放射性物质发生泄漏。R本人自食恶果不足惜,却给世界环境...
    茶点故事阅读 41,490评论 3 331
  • 文/蒙蒙 一、第九天 我趴在偏房一处隐蔽的房顶上张望。 院中可真热闹,春花似锦、人声如沸。这庄子的主人今日做“春日...
    开封第一讲书人阅读 32,035评论 0 22
  • 文/苍兰香墨 我抬头看了看天上的太阳。三九已至,却和暖如春,着一层夹袄步出监牢的瞬间,已是汗流浃背。 一阵脚步声响...
    开封第一讲书人阅读 33,156评论 1 272
  • 我被黑心中介骗来泰国打工, 没想到刚下飞机就差点儿被人妖公主榨干…… 1. 我叫王不留,地道东北人。 一个月前我还...
    沈念sama阅读 48,428评论 3 373
  • 正文 我出身青楼,却偏偏与公主长得像,于是被迫代替她去往敌国和亲。 传闻我的和亲对象是个残疾皇子,可洞房花烛夜当晚...
    茶点故事阅读 45,127评论 2 356