转化子的遗传稳定性的确定是通过将转化子连续继代五代甚至更多代以后,观察其是否具有潮霉素B抗性,且通过PCR检测是否仍然可以扩出相应大小的潮霉素磷酸转移酶基因片段。
实验结果
A,B,C三个基因在CYA固体培养基上共培养后均长出了相应的转化子,接下来在抗性平板上传三代,若能稳定遗传,则提取Genome DNA,设计引物进行PCR验证实验。
传代培养:
CYA固体培养基(潮霉素B 250μg/mL,羧苄青霉素钠500μg/mL)
转化子的遗传稳定性的确定是通过将转化子连续继代五代甚至更多代以后,观察其是否具有潮霉素B抗性,且通过PCR检测是否仍然可以扩出相应大小的潮霉素磷酸转移酶基因片段。
A,B,C三个基因在CYA固体培养基上共培养后均长出了相应的转化子,接下来在抗性平板上传三代,若能稳定遗传,则提取Genome DNA,设计引物进行PCR验证实验。
传代培养:
CYA固体培养基(潮霉素B 250μg/mL,羧苄青霉素钠500μg/mL)