有的时候我们在做免疫荧光和免疫组化的时候，都需要进行组织的处理，然后使用冰冻切片或者是石蜡切片，本人是做眼科方向的，有时候需要将大鼠或者小鼠的眼球包埋后进行冰冻切片，但是最近反映出来一个问题就是在组织的固定以及脱水的过程中，我所处理的组织发生了皱缩和塌陷的情况，最后得到的效果就是我所要的结构和区域根本切不出来，所以针对这个问题查阅了一些资料，慢慢的发现这里边的一些问题，所以在这里跟大家分享一下。
今天呢，先跟大家聊一下，固定液的种类（我试用过的）
（1）最常见的4%的多聚甲醛（PFA）-0.1 mol/L的磷酸盐缓冲溶液（PH=7.3）具体的配置方法呢网上是都有的，这个就不再细说了。
（2）Karnovsky's固定剂（文献中看到的）。这一款的话，其主要的成分就是PFA和25%的戊二醛水溶液。4℃下可以短时间的固定，我一般还是固定过夜，这一种的话，比较温和，比在较低浓度的戊二醛中长时间固定更能保存组织的抗原性和细微结构。
配方大概一说吧，我配的是1000mL的，PFA：30g；25%戊二醛：80mL；0.1 mol/L的PB稀释至1000mL.
（3）4%的多聚甲醛（PFA）-磷酸二氢钠和氢氧化钠的溶液。
配方：A液：PFA：40g 三蒸水：400mL
B液：Na2HPO4·2H2O：16.88g 三蒸水：300mL
C液：NaOH：3.86g 三蒸水：200mL
这个固定剂是比较温和的，适合于组织的长期保存，把他放到4度冰箱里边保存数月后也可以获得比较满意的结果。
当然了，这几种固定剂是我自己尝试过的，适合我自己需求的，当然还有其他的一些固定剂，欢迎大家评论。这几种固定剂呢，都需要调节PH，并且呢都需要使用滤纸过滤一下是最好的。
下一期将跟大家说一下，配制固定剂和脱水剂的时候，所采用的溶剂不同，会对最终组织产生的结果会有什么样的不同。
