ZETA life转染试剂助力揭示lncRNA Gm28309在RAW264.7和THP-1巨噬细胞中调控布鲁氏菌炎症反应的ceRNA机制

1. 文章主要研究方向

标题:《Brucella-Induced Downregulation of lncRNA Gm28309 Triggers Macrophages Inflammatory Response Through the miR-3068-5p/NF-κB Pathway》

方向:研究布鲁氏菌(Brucella)感染如何通过下调长链非编码RNA(lncRNA Gm28309)激活miR-3068-5p/NF-κB信号通路,从而触发巨噬细胞的炎症反应及其分子机制。

2. 2024年影响因子

期刊:Frontiers in Immunology

影响因子:约8.8。

3. ZETA life转染试剂(AD600150)的应用

转染细胞及基因:

• RAW264.7细胞(小鼠巨噬细胞系):

  ◦ 转染基因:lncRNA Gm28309过表达质粒(Gm28309-pcDNA3.1)、miR-3068-5p mimic/inhibitor、siRNA靶向p65(NF-κB抑制剂)。

• THP-1细胞(人单核细胞系,经PMA诱导为巨噬细胞):

  ◦ 转染基因:siRNA靶向候选lncRNAs(如P33714、P3852等)。

4. 转染实验数据及解读

具体实验数据:

1. RAW264.7细胞转染Gm28309(图4A, 4D):

  ◦ 结果:过表达Gm28309显著降低NLRP3炎症小体蛋白(NLRP3、Pro-caspase-1)和炎性因子(IL-1β、IL-18)的表达(p<0.05)。

  ◦ 解读:ZETA life试剂高效递送Gm28309质粒,验证了其对炎症的负调控作用。

2. THP-1细胞转染siRNA靶向lncRNAs(图3A, 3B):

  ◦ 结果:敲低P33714(Gm28309人源同源物)增加IL-1β/IL-18分泌,促进布鲁氏菌清除(p<0.01)。

  ◦ 解读:试剂成功递送siRNA,证明lncRNA在炎症中的关键角色。

3. RAW264.7转染miR-3068-5p mimic(图5C, 5D):

  ◦ 结果:miR-3068-5p过表达降低kB-Ras2(NF-κB抑制因子)的荧光素酶活性,激活炎症通路。

  ◦ 解读:试剂高效转染miRNA,揭示ceRNA调控机制。

ZETA life试剂的贡献:

• 高转染效率确保基因操作(过表达/敲低)的可靠性,支撑了全文分子机制验证。

• 低细胞毒性保障了炎症相关基因表达的精准检测。

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