细胞培养过程中常常加的抗生素一般是青霉素和链霉素的组合体,常用的型号一般有5000 单位/mL 青霉素和 5000 µg/mL 链霉素或者是含 10,000 单位/mL 青霉素和 10,000 µg/mL 链霉素这两种。
青霉素和链霉素对革兰阳性细菌和革兰阴性细菌具有有效的联合抗菌作用,可用于防止细胞培养受到细菌污染。
青霉素(penicillin )由青霉菌培养液中获得,具有作用强、产量高、价格低廉的特性,目前仍是治疗敏感菌的首选药物。我们常常说到的青霉素一般指的是青霉素G。青霉素属于β-内酰胺类抗生素,是作用于细菌细胞壁的抗生素。青霉素通过抑制细菌的转肽酶活性,发挥抑制细菌合成细胞壁的作用,从而杀灭细菌。细胞壁是细菌生物所特有的,而人和动物的细胞是没有细胞壁的,所以我们平常在培养人的原代细胞或者动物细胞时,大概率是不会影响到细胞的正常生长的。
链霉素(streptomycin)是一种氨基糖苷类抗生素。其与结核杆菌菌体核糖核酸蛋白体蛋白质结合,起到了干扰结核杆菌蛋白质合成的作用,从而杀灭或者抑制结核杆菌生长的作用。但是呢仅仅是使用青霉素而言,是不够的,因为青霉素对于那些已经存在细胞壁的,已经进化完成的细菌是不太能起作用的,所以其一般也是被称作繁殖期杀菌剂,所以为了完美的起到抑菌和杀菌的作用,需要配合链霉素共同发挥作用。
如果我们想尝试使用抗生素或抗真菌剂来消除或控制污染时,必须要清楚我们这个抗生素是否会对我们的细胞产生毒性。对生成的各种细菌而言,需要采用不同的工作浓度,不能一概而用。
回到最初的问题,抗生素虽然减少了可以观察到的细菌污染我们细胞的机会,但是也有可能会干扰到细胞的状态,如果其会对细胞产生一定的毒性的话,那么势必会影响到细胞的生活状态,如果出现这样的情况,一定要警惕黑胶虫的出现,这种黑胶虫在国内外没有很精确的定义,普遍认为是胎牛血清当中所带来的,但是黑胶虫的出现也就意味着细胞状态的不良。但是在国内大致认为黑胶虫基本上属于支原体,也就是说过度的使用抗生素,也有可能会增加感染支原体的机会,常常所见到的污染被抑制后,慢慢的发展成隐形污染,是很难发现的。
那么从另外一个方面来讲的话,我们不能忽视过度使用抗生素的耐药性的问题,抗生素耐药性是对目前全球卫生、食品安全和发展的最大威胁之一。抗生素是用于预防和治疗细菌感染的药物。抗生素耐药性会在细菌对使用该类药物发生反应并改变时出现。细菌对抗生素发生耐药,而不是人类或动物。这些细菌可能会感染人类和动物,由此造成的感染与不耐药的细菌相比会变得更难治疗。所以当产生较强的耐药性后,又会增大被污染的几率,并且最严重的事情是一旦发生大规模污染后,常用的这些抗生素将完全失去作用,那么目前所养的细胞只剩下一个结局,扔掉,然后对细胞房和培养箱重新灭菌!
所以呢,对于加不加抗生素,需要考虑的几点:1、饲养细胞的环境,也就是细胞房的环境,如果环境好的话,或者说使用者的使用比较规范的话,是可以来考虑不佳的。2、是否会对细胞产生有一定的细胞毒性,具体细胞具体分析。3、一定要考虑好使用剂量和使用浓度的问题,防止过度使用所导致的耐药性。