2018年的文章，3分多，看看都干了些什么吧。

连一张机制的图都没有，看来没有什么新玩意儿

摘要：活性氧（ROS）已被广泛接受为在各种生物过程（包括增殖，分化和凋亡/肥大性/坏死性细胞死亡）中起调节作用的关键分子。越来越多的证据表明，ROS可能参与了上皮-间质转化（EMT）的诱导，据报道，EMT可以促进癌干样细胞（CSC）的产生。最近的数据表明，ROS积累的改变与CSC的产生，EMT和低氧暴露有关，但对潜在的机制了解甚少。在本研究中，我们从Panc-1人胰腺癌细胞中衍生了CSC，并使用连续重铺测定和Western blot分析对它们进行了表征。活细胞的功能鉴定使用CCK-8分析和集落形成分析进行。通过蛋白质印迹分析在Panc-1 CSC中测量了各种抗氧化剂酶的表达，包括超氧化物歧化酶（SOD）和谷胱甘肽过氧化物酶（GPX）。 GPX4在调节Panc-1 CSC生物学过程中的作用通过有或没有氧化应激的增殖，球形成和侵袭试验进行了评估。通过敲低siRNA或过表达载体来操纵GPX4表达，以评估包括增殖，集落形成和侵袭在内的功能。通过RT-qPCR和Western blot分析检测GPX4改变后的EMT标志基因。 Panc-1 CSC对缺氧暴露表现出更大的抵抗力。与亲代Panc-1细胞相比，Panc-1 CSCs的内源GPX4水平明显升高，表明它们在维持体内稳态中的作用。在GPX4敲低过程中，暴露于H2O2或erastin的氧化应激会促进ROS的积累。此外，GPX4的过表达消除了氧化应激暴露引起的ROS诱导，因此对Panc-1 dCSC的生理过程产生了保护作用。击倒GPX4使细胞周期在G1 / G0期停止。抑制Panc-1CSC中的细胞增殖，集落形成，侵袭和干性表型；并降低了EMT表型。总体而言，GPX4在维持Panc-1 CSC中的氧化稳态和调节几种生物学过程（包括干性和EMT）方面起着至关重要的作用。

作者通过在培养基中加入一些生长因子，21天后又到了CSC细胞形成，首先验证了CSC,这就有点意思，通过成球、CCK8和干性相关的分子表达这些证据就足以证明细胞成了CSC了吗？

然后，作者模拟体内缺氧环境，通过应用MUTLIGAS培养系统，用1%的氧气培养细胞，发现，CSC细胞在缺氧环境中更有抗性，并且GPX4/SOD1/SOD4表达均较亲本细胞高，提示GPX4/SOD1/SOD4可能发挥了这种耐缺氧的特性，可以发现，GPX4在干性细胞中并不是缺氧诱导形成的，可见，是肿瘤本身内源性产生增多，促进了肿瘤对缺氧的耐受以及对氧化应激的抵抗力，肿瘤GPX4本身的升高可能对肿瘤干性有重要作用。

然后作者就敲了GPX4，分别用不同的诱导氧化应激的方法刺激肿瘤细胞，然后在观察肿瘤的死亡情况，发现了敲除GPX4以后，细胞对氧化应激的抵抗下降，提示GPX4有助于维持CSC细胞的内环境稳态的作用。作者也是奇怪，为什么就直接看中了GPX4这个靶点，难道是前文吗，或者作者本来就冲着GPX4来的，再说了ERASTIN 的计量为什么是2？

既然作者发现了GPX4在维持CSC中起到作用，那么敲除后干性是否消失？紧接着作者就看了看，和预期一致。

在CSC细胞中过表达GPX4会不会与抑制起到相反的结果呢，作者又在CSC中过表达了一遍，得到一致的结论。

因为干性与EMT密切相关，作者看看GPX4的表达与EMT的相关性，发现了GPX4高表达也促进了EMT过程。

全文结束，仅有细胞实验，并且这些细胞实验所涉及的内容基本上都是已知，没有动物实验，还能再18年底发3.4分文章，真是神奇。

对了从最后一个图里你能发现什么没有，为什么erastin刺激后会有MET的效果？？？？

低分文章总能给我思路，这篇文章如果我来做，会是这么样，前面当然和他做的一样，后面我可能会深入探讨GPX4与EMT的机制问题，是不是有重要分子介导了这一个过程，使两者联系在一起，当然这里要测序了，瞬间档次就有所提升，还有，既然过表达了GPX4和敲出了GPX4为什么不做一做动物，然后，在组织水平验证GPX4的临床意义（可能已经有人验证过了）或者GPX4与EMT相关联的那个蛋白的临床意义也行，或者在人组织中进行肿瘤异质性检验，通过GPX4表达水平的高低与临床关联也行啊，更高大上的做做CYTOF，是不是能发现一个CSC高转移特征的基因集也说不准，然后再验证一下，说不准就是下一个国自然课题。夜深了，胡思乱想了一会。