大肠杆菌感受态

1 DH5a菌株 

DH5a是一种常用于质粒克隆的菌株。E.coli DH5a在使用pUC系列质粒载体转化时,可与载体编码的β-半乳糖苷酶氨基端实现α-互补。可用于蓝白斑筛选鉴别重组菌株。  

基因型:F-,φ80dlacZΔM15,Δ(lacZYA-argF)U169,deoR,recA1,endA1,hsdR17(rk-,mk+),phoA,supE44,λ-,thi-1,gyrA96,relA1  

2 BL21(DE3) 菌株  

该菌株用于高效表达克隆于含有噬菌体T7启动子的表达载体(如pET系列)的基因。T7噬菌体RNA聚合酶位于λ 噬菌体DE3区,该区整合于BL21的染色体上。该菌适合表达非毒性蛋白。  

基因型:F-,ompT, hsdS(rBB-mB-),gal, dcm(DE3)  

3 BL21(DE3) pLysS菌株  

该菌株含有质粒pLysS,因此具有氯霉素抗性。PLysS含有表达T7溶菌酶的基因,能够降低目的基因的背景表达水平,但不干扰目的蛋白的表达。该菌适合表达毒性蛋白和非毒性蛋白。  

基因型:F-,ompT hsdS(rBB-mB-),gal, dcm(DE3),pLysS ,Camr  

4 JM109菌株  

该菌株在使用pUC系列质粒载体进行DNA转化或用M13 phage载体进行转染时,由于载体DNA产生的LacZa多肽和JM09编码的LacZΔM15进行α-互补,从而显示β-半乳糖苷酶活性,由此很容易鉴别重组体菌株  

基因型:recA1,endA1,gyrA96,thi-1,hsdR17,supE44,relA1,Δ(lac-proAB)/F’[traD36,proAB+,lacIq,lacZΔM15]  

5 TOP10菌株  

该菌株适用于高效的DNA克隆和质粒扩增,能保证高拷贝质粒的稳定遗传。  

基因型:F- ,mcrAΔ(mrr-hsd RMS-mcrBC), φ80 ,lacZΔM15,△lacⅩ74, recA1 ,araΔ139Δ(ara-leu)7697, galU ,galK ,rps, (Strr) endA1, nupG  

6 HB101菌株  

该菌株遗传性能稳定,使用方便,适用于各种基因重组实验 

7 DB3.1菌株

DB3.1菌株基因组中整合有gyrA462基因,使得该菌株可耐受致死基因ccdB的表达产物,因此该菌株特别适用于含有ccdB基因的质粒构建、扩繁;缺失核酸内切酶 (endA1),提高了质粒DNA的产量和质量;该菌株具有链霉素抗性。本产品经优化的感受态制备工艺制备而成,使用pUC19质粒DNA检测,转化效率可达1×109 cfu/µg。

8 Tsurbo菌株

TSurbo是细菌快速生长、转化效率大于10⁹ cfu/µg的化学感受态细胞,涂板6.5 h即可见克隆,培养基中摇菌培养3~5 h即可小量提取质粒。该菌株属 于Trelief TM 5α超级感受态诱变株,具有T1噬菌体抗性,突变的∆lacZM15基因产物与载体携带的β-半乳糖苷酶基因表达产物实现α互补,加入laclq基因更严谨的控制Lac启动子的开启,极大的降低了蓝白斑筛选中的假阳性率,endA1的突变有利于克隆DNA的稳定和高纯度质粒DNA的提取。

9 TSach1-T1菌株

TSach1-T1 是转化效率大于10⁹ cfu/mu;g快速生长化学感受态细胞,涂板8-9h可见克隆。基因组缺失核酸内切酶(endA),提高了质粒DNA的产量和质量,重组酶缺陷型(recA1398)减少插入片段的同源重组概率,保证了插入DNA的稳定性,lacZ△M15的存在使TSach1-T1 可用于蓝、白斑筛选,tonA突变赋予TSach1-T1菌株对于T1和T5噬菌体的抗性。使用pUC19质粒检测转化效率高达1.5X10⁹ cfu/ug DNA。

10 DH10B菌株

DH10B菌 株 来 源 于 MC1061菌 株 , 缺 失 核 酸 内 切 酶 (endA1), 提高了质粒DNA的产量和质量;重组酶缺 型 (recA1)减少插入片段的同源重组概率,保证了插入DNA的稳 定性;mcrA、mcrBC及mrr基因突变使得DH10B菌株适合于克 隆富含甲基胞嘧啶或甲基腺嘌呤DNA;ø80lacZ∆M15的存在使得DH10B可用于蓝白斑筛选实验;rpsL赋予该菌株链霉素抗性。本产品经优化的感受态制备工艺制备而成,使用pUC19质粒DNA检测,转化效率可达1×109 cfu/µg。

11 JM110菌株

JM110是dam、dcm甲基化功能缺失菌株,从该菌株提取的质粒DNA序列中GATC、CCAGG、CCTGG不被甲基化修饰 , 因此可以被对dam、dcm甲 基 化 敏 感 的 内 切 酶 切 割 。lacIqlacZ∆M15的存在使得JM110可用于蓝白斑筛选实验;该菌株具有链霉素抗性。本制品经优化的感受态制备工艺制备而成 , 使用pUC19质 粒 DNA检 测 , 转 化 效 率 可 达 108 cfu/µg。

12EPI300菌株

EPI300菌株基因组整合了突变的trfA基因,在未添加诱导 剂情况下,携带有oriV复制的质粒拷贝数约1-2 copies/cell, 添加诱导剂L-阿拉伯糖情况下 , 质粒拷贝数 可增加到约 15~20 copies/cell, 因此该菌株特别适用于各种不稳定DNA或毒性基因的克隆;缺失核酸内切酶 (endA1),提高了质粒DNA的产量和质量;重组酶缺陷型(recA1)减少插入片段的同源重组概率,保证了插入DNA的稳定性 ;mrr-hsdRMS- mcrBC基因缺陷使得EPI300适合于克隆富含甲基胞嘧啶或甲基腺嘌呤的DNA;ø80dlacZ∆M15使得EPI300可用于蓝白斑筛选;rpsL赋予该菌株链霉素抗性。本产品经优化的感受态制备工艺制备而成,使用pUC19质粒DNA检测,转化效率可达 5X108cfu/µg。

13 TSINGKE TSC-E06 BL21 Star(DE3) 菌株

BL21 Star (DE3)菌株来源于BL21 (DE3)菌株,感受态细胞内含有rne131基因突变(编码RNase E),RNase E是参与mRNA降解的核心酶之一,故该基因突变可显著增强mRNA的稳定性,从而提高异源蛋白产量。主要适用于低拷贝的T7启动子表达载体(如PET系列)的高水平蛋白表达,同时含有大肠杆菌RNA聚合酶,也可用于非T7启动子表达载体(如pGEX系列)的蛋白表达。由于该菌株中mRNA稳定性的提高,BL21 Star (DE3)具有更高的基本表达,因此不适合表达毒性蛋白。本产品经优化的感受态制备工艺制备而成,使用pUC19质粒DNA检测,转化效率可达1×108 cfu/µg。


14 Stbl3菌株

是收集生长在对数期的Stbl3菌,加入含有甘油的细菌冻存液制备而成。可以直接划平板或小量、大量培养。特别适合作为慢病毒(lentivirus)载体和其它逆转录病毒载体等含有重复序列的载体或其它较大并且不太稳定的载体的宿主菌以进行质粒的转化、克隆和扩增。大肠杆菌Stbl3菌株来源于HB101 E. coli 菌株,其基因组含有重组酶recA13突变,可以抑制长片段末端重复区的重组,所以能有效转化、克隆和扩增含有重复序列的慢病毒载体和其它逆转录病毒载体。本菌株非常稳定,和常见的大抽杆菌菌株相比,对于慢病毒载体等较大质粒或其它不稳定载体的转化效率以及克隆和扩增的稳定性有显著提高。Stbl3菌株的基因型:F- mcrB mrr hsdS20 (rB-, mB-) recA13 supE44 ara-14 galK2 lacY1 proA2rpsL20(StrR) xyl-5λ- leu mtl-1 endA1+。本菌株具有链霉素抗性,并且不能用于质粒的蓝白斑筛选。本菌株可以使用常规的LB培养基或SOC培养基进行培养。

15 EPI400菌株

EPI400来源于EC100菌株,将EC100核基因中控制质粒拷贝数的pcnB基因删除后引入一个诱导启动子驱动的pcnB基因,即是EPI100菌株。EPI400菌株可以降低质粒的拷贝数,特别适合于各种不稳定DNA或毒性基因的克隆,在加入WDEPI-诱导剂 I 后又可以提高质粒产量到正常状态。[mcrA,Δ(mrr-hsdRMS-mcrBC)]基因型使EPI400菌株适合于克隆富含甲基胞嘧啶或甲基腺嘌呤的DNA 。recA1和endA1的突变有利于插入DNA的稳定和高纯度质粒DNA的提取。lacZΔM15 标记的存在使EPI400可用于蓝白斑筛选,tonA赋予其抗噬菌体T1和T5的能力,rpsL赋予其链霉素抗性。EPI400感受态细胞经特殊工艺制作,pUC19质粒检测转化效率可达5×107 cfu/μg DNA。

基因型:F- mcrA Δ(mrr-hsdRMS-mcrBC) Φ80dlacZΔM15 ΔlacX74 recA1 endA1 araD139 Δ(ara, leu)7697 galU galK λ- rpsL(StrR) nupG trfA tonA pcnB4 dhfr

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