1.云服务器
这两天没事试着搭建了一个服务器，顺手通过看书自学了Linux，下载了VMware虚拟机，安装了linux系统。也算是打开了第一步，接着遇到了两个问题：1.虚拟机建立的linux不能复制粘贴；2.每次出来查找相关的命令行都要重新点击虚拟机进入，以及按ctrl和alt退出。时间长了，操作很麻烦。于是下载了X shell 6，经过一晚上的IP地址的设定，终于顺利连接上了虚拟机。可是，等等……我的云服务器不也可以这样连接么？！
不过，现在觉得这个1核2G云服务器内存太小，目前除了用来练习代码和搭建个人博客之外，还没有想到很好的用法，先挖个坑，等有想法了搭建个个人的博客玩玩吧……
顺嘴吐槽一下，我在云服务器上下载个东西也太慢了吧，不知道是我自己的网的问题还是服务器的带宽的问题？？我的是1M的，不过比较好的是可以后台下载软件，睡个觉也能下载好，如果用那种运算比较快的应该会很爽吧！
2.Cas9基因编辑
学习一个技术最好的办法是先读综述，了解这个技术。之前老师让我做CRISPR-Cas9,一直觉得比较复杂，今天看了相关的内容觉得还是可以接受的，只不过是之前的方式有点不对。
这里可以参考一下前辈的cas9记录，对我帮助真的很大，总结的很详细，基本上是从小白带入的。而且总结的也很好，也因此想记录一下自己的生活和疑问。
1.在不同的Cas载体中是如何做选择的，目前比较相中的是pSpCas9(BB)-2A-Puro (PX459) V2.0和PX458,前者有嘌呤霉素筛选，后者有荧光蛋白的筛选。对于荧光蛋白，我在之前是吃过亏得，做免疫荧光的时候会有很大的影响，需要进一步调整激活的波长和荧光的颜色，所以这一点要慎重考虑。同时也要考虑到挑选单克隆细胞时候的方法，这就引出了第二个疑惑点.
2.挑选单克隆细胞的方法主要有哪些？当前实验室能否完成？是否有必要做单克隆挑选？后续的试验方法会影响前面质粒载体的挑选，比如：如果是用荧光的流式分选的话，就必须选择带有荧光的458。
3.后续测VHL基因的引物能否直接用ZHX2的那篇文章里的，对于测序后是否成功的判断，这一部分还需要进一步的阅读。
4.如果要做，看一下其他的材料准备。
