做载体构建的时候，很多新手容易踩坑：直接拿克隆载体去转细胞做蛋白表达，忙活半天检测不到目的蛋白。根源就是分不清克隆载体（Cloning vector）和表达载体（Expres...
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分子克隆必看：克隆载体和表达载体怎么区分？ -
Western Blot 里的封闭步骤到底有什么用？不封闭会怎么样？
很多刚上手 WB 的同学都会疑惑：转膜之后，明明可以直接孵一抗，为什么还要多一步封闭？甚至有人图省事跳过封闭，最后结果满膜杂带、背景黑乎乎，就是踩了这个坑。 一、WB 封闭的...
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科研级AAV病毒包装
做基因治疗、神经科学、体内基因功能研究的，几乎绕不开腺相关病毒（AAV）。凭借低免疫原性、安全性高、组织特异性高等优势，rAAV 已经成为体内递送的首选载体之一。但 AAV ...
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IF 28.4！海军军医大学第三附属医院王葵/沈峰/董辉等团队揭示 TREM2+ 和 TIMD4+ 巨噬细胞是ICC免疫抑制性TME的关键调节因子肝内胆管癌（ICC）是第二常见的原发性肝癌，巨噬细胞是肿瘤微环境（TME）的关键组分，TREM2+巨噬细胞最近在多种癌症中被鉴定为促肿瘤进展的重要参与者。然而ICC中巨噬细胞...
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siRNA：一把精准 “叫停基因” 的分子剪刀，科研人该怎么用好它？
做基础实验的同学几乎都绕不开基因敲低。想证明一个基因的功能，最经典思路就是：把它关掉，看细胞、动物会发生什么变化。而 siRNA，就是目前体外瞬时敲低里最常用、上手最快的工具...
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【病毒包装技术】AAV、慢病毒、腺病毒该怎么选？做基因功能研究，绕不开"把外源基因送进细胞"这件事。质粒转染能解决一部分问题，但只要遇到难转染细胞、原代细胞、在体给药、需要长期稳定表达，就需要使用病毒载体了。 慢病毒：细胞...
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为什么你的 WB 总有多条带？
很多同学跑 WB，默认目标蛋白就该是干干净净单一条带，一旦跑出多条带，第一反应就是抗体不行、实验翻车。但其实多条带分两种：蛋白本身真实存在的条带，和实验引入的非特异性杂带，处...
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基因功能研究必备：什么是病毒包装？
很多刚进实验室做基因过表达、敲低的同学，第一次听到 “病毒包装” 时都会疑惑：我们是在生产致病病毒吗？ 答案是否定的。病毒包装，是分子与基因治疗领域的一项实验技术：改造天然病...
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做体内 /体外基因实验，AAV、腺病毒、慢病毒该选哪一个？
腺相关病毒（AAV，Adeno-associated virus） AAV 属于细小病毒，无包膜，单链 DNA，不整合宿主基因组（极低概率随机整合） 包装容量：上限约 4.7...
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IF 17.5！中南大学湘雅医院王伟/潘柏宏团队Nature 子刊发文揭示SIRT7去乙酰化SRF抗腹主动脉瘤新机制腹主动脉瘤（AAA）是一种危及生命的心血管疾病，目前尚无有效的药物治疗手段。组蛋白去乙酰化酶（HDAC）是心血管病理生理过程的关键调控分子，但各个HDAC亚型在腹主动脉瘤发生...
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siRNA与shRNA到底有啥区别？搞懂这两点，基因沉默实验不再懵在分子生物学实验中，RNA干扰（RNAi）是研究基因功能的常用手段。而谈到RNAi，就绕不开两个核心工具：siRNA和shRNA。很多刚接触实验的小伙伴经常搞混它们，今天我们...
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Phytomedicine (IF 11.3)｜广东省中医院莫秀梅/李红毅/晏烽根团队揭示培土清心方改善特应性皮炎的分子机制鞘脂代谢失调在特应性皮炎（AD）中发挥关键作用，然而针对该通路的治疗选择仍然有限。传统方剂培土清心（PTQX）显示出临床疗效，但其分子机制在很大程度上尚未明确。近期广东省中医...
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Nat Commun (IF 18.1): 重医胡文全、天坛医院李凯、中科大段亚君团队揭示ACSS2促进MASLD向MASH转变的关键机制炎症是推动代谢功能障碍相关脂肪性肝病（MASLD）向代谢功能障碍相关脂肪性肝炎（MASH）进展的关键驱动因素，MASH疾病侵袭性强，与较高的肝脏相关死亡率密切相关，但介导肝脏...
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融合蛋白接头 Linker该怎么选？
融合蛋白含义之一即是通过DNA重组技术得到的两个基因重组后的表达产物。构建融合蛋白的原则是将第一个蛋白基因的终止密码子删除，再接上带有终止密码子的第二个蛋白基因，即可实现2个...
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常用的免疫组化荧光染色方法
免疫荧光组织化学是根据抗原抗体反应的原理，先将已知抗体标记上荧光素，再用这种荧光抗体作为探针，检测细胞或组织切片内对应的抗原（也可标记已知抗原检测样本内抗体，该模式在组织样本...
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AAV 和腺病毒该如何选择？
很多做完腺病毒、准备做动物实验的同学，下一步就会纠结 AAV 和腺病毒的选型： 二者都不整合宿主基因组、都能感染非分裂细胞，看上去很像，实际适用场景几乎是互补的。不少人直接把...