腺病毒载体能感染分裂和非分裂细胞。它适用于体内和体外基因传递，转染效率高，对外源基因瞬时表达量高。但相对于其他病毒载体系统，腺病毒载体在靶细胞中具有相对较高的免疫原性。您应考...
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腺病毒载体使用指南：什么情况下优先用它做基因递送？
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AAV 在肝脏中的递送方式有哪些？肝脏对全身应用AAV有较高的亲合性，AAV在肝脏中的注射方式分为直接传送和外周传送两种（下表所示），其中尾静脉注射和腹腔注射是目前应用比较广泛的注射方式，操作者也可根据实验目...
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做 AAV 肝内注射总失败？这些关键操作一定要注意
肝内注射 AAV 是实现肝脏局部高效转导的经典方式，相比尾静脉注射，能大幅降低 AAV 使用剂量、减少全身扩散，特别适合肝脏基因功能研究、肝病模型等课题。 本文详述AAV 肝...
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做腺病毒总失败？包装关键步骤都在这了做基因功能、疫苗、溶瘤病毒、细胞标记实验，腺病毒是真的好用 —— 表达强、快、不整合、滴度高。但很多人第一次包装腺病毒都会踩坑：不长空斑、不病变、收不到毒、污染、滴度低。这篇...
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腺病毒是怎么一步步 “入侵” 细胞的？很多做科研、基因治疗、疫苗研究的人，都绕不开腺病毒载体。但很多人只知道它好用，却不清楚：腺病毒到底是怎么一步步钻进细胞、完成感染的？ 1. 吸附：先 “抓住” 细胞 腺病毒要...
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搞懂腺病毒载体，看这篇就够了！腺病毒 (Adenovirus，Adv) 是一种无包膜的 DNA 病毒，其复制不依赖于宿主细胞的分裂。腺病毒拥有近50 个血清型，大多数腺病毒载体是基于血清型 2 和血清型 ...
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AAV脑立体定位注射小鼠具体如何操作脑定位注射，相比其他注射方式靶向性强，注射病毒体积小，但是侵入性也强，且对操作者具有很高的要求。在立体定位手术时，颅骨上常用的注射参照点是前囟， 也就是中矢状冠状缝的交叉点（...
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AAV皮下及皮内注射小鼠保姆级教程
皮下注射 1.使用戊巴比妥钠麻醉小鼠后，用剃毛器将小鼠腰背部的毛剃掉，用 70% 的酒精擦拭； 2. 抓住背部中线褶皱处皮肤，轻轻向上提拉，形成“帐篷”形状，以最大限度的减少...
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AAV眶后静脉窦注射新生小鼠的详细步骤1. 将新生小鼠放在预冷的纸巾上 30-60s, 进行麻醉 ; 或： 在纸巾上滴加 0.5 mL 异氟烷，并将纸巾放入 50 mL 的锥形管中，拧紧瓶盖，静置 1 min。将...
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Cell重磅！中大张弩/北大白凡团队解锁胶质母细胞瘤免疫新机制，脑膜血管阻断术破解脑瘤治疗困境胶质母细胞瘤（GBM）是最致命的原发性中枢神经系统（CNS）肿瘤，其肿瘤微环境（TME）具有强免疫抑制性，缺乏有效肿瘤特异性细胞毒性T淋巴细胞（CTLs），现有免疫治疗响应率...
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AAV面静脉注射新生小鼠的具体操作对于成年小鼠来说，通过尾静脉注射是比较简单的注射方式，但如果实验动物模型为新生小鼠，那么面静脉可能是更加合适的注射位点。 1. 将新生小鼠放在预冷的纸巾上 30-60s, 进...
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AAV尾静脉注射小鼠的具体操作1. 将小鼠放在固定器中，使尾部充分暴露； 2. 在小鼠尾部喷洒 70% 异丙醇； 3. 将小鼠尾巴拉直，使尾巴两侧的静脉清晰可见； 4. 将针头尽可能远的插入尾部侧面静脉；...
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打破肺纤维化僵局！ 河南中医药大学李建生教授团队解密醛糖还原酶在IPF进展中的作用机制与靶向干预策略特发性肺纤维化（IPF）是一种进行性、致死性肺病，治疗选择有限，预后差，巨噬细胞向促纤维化M2表型极化是其关键病理过程。糖尿病是IPF的危险因素，而醛糖还原酶（AR）抑制剂已...
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Nature子刊揭秘神经突触的“钙”世英雄！南科大魏志毅/北大深研院张勃团队联合在Nat Commun发文揭示C1ql1介导突触连接的分子机制细胞黏附分子（CAM）在建立和维持突触连接中至关重要。最新证据表明，突触间隙内的一些分泌因子，包括C1q样蛋白，通过连接两侧的CAM在突触前和突触后起着重要的桥接作用。然而，...
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CRISPR/Cas9系统的作用机制
CRISPR/Cas9 系统功能的实现必须具备两个必要条件：①与 crRNA 互补的 DNA 序列；②原间隔 序列邻近基序（protospacer-adjacent moti...
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CRISPR/Cas9基因编辑系统组成
CRISPR/Cas 系统是细菌和古细菌在长期演化过程中形成的一种适应性免疫防御机制，可对抗入侵的病毒及外源 DNA。CRISPR/Cas 系统分为两类：第 1 类包含 I、...
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siRNA合成方法有哪些？
siRNA（小干扰 RNA）的合成技术目前已趋于成熟，根据合成场所和技术原理，主要分为化学合成法、体外转录法和酶促合成法三大类，不同方法在成本、通量、修饰灵活性等方面各有优势...
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siRNA与shRNA的区别及选择指南
siRNA（小于扰RNA）和shRNA（短发夹RNA）均是实现RNA干扰（RNAi）、特异性沉默基因表达的工具，但其作用机制与特性不同。 siRNA是化学合成的双链RNA分子...
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【RNA干扰】siRNA的作用机制
siRNA（小干扰 RNA）是介导RNA 干扰（RNAi） 的核心分子，通过特异性降解靶基因 mRNA，在转录后水平沉默基因表达，其作用机制可分为起始阶段和效应阶段，全程高度...