肺动脉高压（PH）是一种进行性、危及生命的疾病，其主要特征为肺血管重构，其中内皮功能障碍起着至关重要的作用。然而，导致这一病理过程的分子因素尚不完全清楚。以往研究通过对缺氧处...
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Circulation（IF 41.3）重磅！山东大学张梅/戴珅/刘凤鸣团队揭示肺动脉高压血管重构调控新机制 -
【重组DNA转化子筛选攻略】四种经典筛选方法（抗性/蓝白斑/营养缺陷/噬菌斑）详解
为方便转化子的筛选，在构建重组DNA载体时，重组体上通常会携带一定的遗传标记基因。利用这些标记，在特定的培养条件下可将转化子从非转化细胞中筛选出来。最基本的筛选手段是使用选择...
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分子克隆避坑指南：一文讲透大肠杆菌感受态制备与转化的关键细节
在分子生物学实验中，大肠杆菌质粒转化是最基础、最高频的核心操作，很多新手实验失败、转化效率低、出现假阳性结果，大多是对转化底层原理和关键细节把控不到位。本文结合实验实操逻辑，...
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Cre/LoxP重组系统
一．Cre/LoxP重组系统作用原理 1. Cre重组酶和LoxP位点 Cre重组酶（Cyclization Recombination Enzyme）由大肠杆菌噬菌体P1的...
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恭贺！信念医药帕金森基因治疗登顶Nature Medicine！维真生物获旗下AAVT42等三大临床血清型独家授权2026年6月10日，专注前沿基因治疗领域的创新型企业信念医药集团（Belief BioMed，BBM，下称“信念医药”）宣布，其自主研发和生产的BBM-P002治疗中晚期帕...
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原核表达载体的启动子和终止子
在克隆载体的基础上，表达载体的构成特别强调与表达强弱相关的构成元件如启动子、 终止子、核糖体结合位点等。 1.启动子 启动子位于转录起始点上游，是DNA 链上一段能与RNA聚...
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什么时候选用腺病毒载体作为将外源基因导入细胞的工具？腺病毒载体能感染分裂和非分裂细胞。它适用于体内和体外基因传递，转染效率高，对外源基因瞬时表达量高。但相对于其他病毒载体系统 腺病毒载体在靶细胞中具有相对较高的免疫原性。当有以...
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紫外分光光度法核酸定量的原理是什么？看完这篇彻底搞懂
紫外分光光度法是分子生物学实验中最常用、最便捷的核酸定量检测方法，无需复杂染色、样本损耗低，可快速测定DNA、RNA的浓度与纯度，其核心原理基于核酸分子的紫外吸收特性与朗伯-...
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慢病毒和逆转录病毒到底有什么区别？
很多做细胞稳转、基因编辑的朋友都会疑惑：慢病毒和逆转录病毒是什么关系？二者又该如何选择？其实慢病毒本身就属于逆转录病毒科，我们实验中常说的 “逆转录病毒”，一般特指γ- 逆转...
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高分案例教你如何应用双荧光素酶技术
双荧光素酶报告基因技术（Dual-Luciferase Reporter Assay, DLR）是一种高灵敏度、双报告系统的生物发光技术，核心是在同一细胞中同时表达萤火虫荧光...
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腺相关病毒/AAV包装技术AAV 包装核心是三质粒共转染 HEK293T 细胞，在无辅助病毒条件下原位组装出携带目的基因的重组 AAV 颗粒，兼具高安全性、低免疫原性、长期表达等优势，是体内外基因递送...
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【慢病毒包装技术】完整实验流程慢病毒包装是借助宿主细胞组装复制缺陷型慢病毒颗粒，用于体外细胞、体内基因递送的常用分子实验技术，广泛应用基因敲入、沉默、过表达研究。 一、核心原理 依托三代四质粒系统，将目的...
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【AAV靶向内耳】启动子的选择
耳朵分为外耳、中耳和内耳三部分，其中外耳和中耳传导声波，内耳是听觉和位觉感受器。在结构上，外耳包括耳廓和外耳道，中耳由鼓膜、鼓室及听骨链组成，内耳位于颞骨岩部内，包括半规管、...
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碱裂解法提取质粒DNA的原理及操作步骤
碱裂解法是小量制备DNA 较好的方法。基本原理是利用质粒较小且为超螺旋共价闭合环状分子的特点，它与染色体DNA 在拓扑学上有很大差异来分离。即在碱性 pH (12～12.5)...
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科研速记：转座子分类+结构特征汇总
转座子(transposon,Tn) 是存在于染色体 DNA上可自主复制和位移的基本单位。转座子存在于所有的生物体内，人类基因组中有35%以上的序列为转座子序列，其中大部分与...