双荧光素酶报告基因技术（Dual-Luciferase Reporter Assay, DLR）是一种高灵敏度、双报告系统的生物发光技术，核心是在同一细胞中同时表达萤火虫荧光...
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高分案例教你如何应用双荧光素酶技术
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腺相关病毒/AAV包装技术AAV 包装核心是三质粒共转染 HEK293T 细胞，在无辅助病毒条件下原位组装出携带目的基因的重组 AAV 颗粒，兼具高安全性、低免疫原性、长期表达等优势，是体内外基因递送...
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【慢病毒包装技术】完整实验流程慢病毒包装是借助宿主细胞组装复制缺陷型慢病毒颗粒，用于体外细胞、体内基因递送的常用分子实验技术，广泛应用基因敲入、沉默、过表达研究。 一、核心原理 依托三代四质粒系统，将目的...
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【AAV靶向内耳】启动子的选择
耳朵分为外耳、中耳和内耳三部分，其中外耳和中耳传导声波，内耳是听觉和位觉感受器。在结构上，外耳包括耳廓和外耳道，中耳由鼓膜、鼓室及听骨链组成，内耳位于颞骨岩部内，包括半规管、...
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碱裂解法提取质粒DNA的原理及操作步骤
碱裂解法是小量制备DNA 较好的方法。基本原理是利用质粒较小且为超螺旋共价闭合环状分子的特点，它与染色体DNA 在拓扑学上有很大差异来分离。即在碱性 pH (12～12.5)...
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科研速记：转座子分类+结构特征汇总
转座子(transposon,Tn) 是存在于染色体 DNA上可自主复制和位移的基本单位。转座子存在于所有的生物体内，人类基因组中有35%以上的序列为转座子序列，其中大部分与...
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搞懂顺式作用元件，先从这篇基础科普开始！
很多学分子生物学、做科研的同学，经常碰到顺式作用元件这个概念，但一直分不清它到底是什么、在哪、有什么用，还容易和反式作用因子搞混。今天用通俗好懂的语言，把顺式作用元件的核心定...
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什么时候选择慢病毒载体？
慢病毒（Lentivirus）是一类改造自人免疫缺陷I型病毒的病毒载体，是逆转录病毒的一种，基因组是单链RNA。区别于腺病毒和腺相关病毒，慢病毒能够介导外源基因整合至宿主基因...
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做肾脏基因干预，AAV 注射哪种方式成功率更高？给药途径的选择是基因治疗有效性的重要决定因素。哺乳动物的肾脏具有严格的过滤功能，排斥大于50kDa的蛋白质，此外，肾小球内的足细胞形成直径仅为10nm的狭缝横膈膜，传统的AA...
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肺部AAV注射怎么打？AAV感染肺部的方法有多种，较为常用的方法有鼻内滴注法、气管插管术、气管内注射，如果对肺部感染AAV的特异性要求较低，也可采用静脉注射、腹腔注射等方法，当进行肺癌成瘤实验时，...
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重磅合作！维真生物获信念医药顶尖基因治疗AAV血清型独家授权全球基因治疗赛道迎来爆发式增长，腺相关病毒（AAV）作为基因递送核心载体，其血清型的性能直接决定治疗效果与安全性，新型AAV血清型研发是突破技术瓶颈、推动临床应用的关键。全球...
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神经科学必备：钙成像技术到底是什么？
细胞（尤其神经元、心肌细胞）活化时，胞内钙离子浓度会快速瞬时升高，钙离子可作为细胞兴奋、信号传导的天然标志物；钙成像利用这一特性，通过荧光探针捕捉钙信号变化，将细胞电活动 /...
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CRISPR/Cas13系统的作用机制CRISPR/Cas13 系统是目前发现的能够靶向 RNA 的 CRISPR 系统，该系统的发现扩展了 CRISPR 系统在病毒干扰方面的应用。新发现的 Cas13 蛋白第四...
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siRNA 是如何调控基因的？在分子生物学与基因研究的浪潮中，RNA 干扰（RNAi）技术凭借其精准的基因调控能力，成为科研领域的重要工具，而siRNA（小干扰 RNA） 作为 RNAi 通路的核心执行者...
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RNA 编辑利器：CRISPR/Cas13 系统概述RNA 作为一种重要的生物大分子，参与细胞生命代谢的整个过程，其代谢异常会导致多种疾病的发生。 与相对稳定遗传的 DNA 不同，RNA 引起的改变是暂时的、非永久性的，但是 ...
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什么是 dCas9？和普通 Cas9 到底有什么区别？一篇看懂dCas9（dead Cas9）是 Cas9 蛋白的突 变 体， 即 因 Cas9 的 RuvC1 和 HNH 两个核酸酶活性区域同时发生突变产生，其剪切酶活性丧失，只保留了...
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做基因递送实验，腺病毒、慢病毒、AAV 该选哪个？对于转染困难的细胞，科研工作者通常会选择病毒来导入目的基因。目前，腺病毒、慢病毒和腺相关病毒是常用的病毒载体工具。那么如何选择适合您实验体系的病毒工具，请参考下面3种病毒工具...
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腺病毒载体使用指南：什么情况下优先用它做基因递送？
腺病毒载体能感染分裂和非分裂细胞。它适用于体内和体外基因传递，转染效率高，对外源基因瞬时表达量高。但相对于其他病毒载体系统，腺病毒载体在靶细胞中具有相对较高的免疫原性。您应考...
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AAV 在肝脏中的递送方式有哪些？肝脏对全身应用AAV有较高的亲合性，AAV在肝脏中的注射方式分为直接传送和外周传送两种（下表所示），其中尾静脉注射和腹腔注射是目前应用比较广泛的注射方式，操作者也可根据实验目...