【2】WB实验检查清单:样本制备

实验步骤：样本制备

关键控制点：

1）避免靶标蛋白的降解

①添加复合蛋白酶抑制剂。

②涉及蛋白修饰的，添加相应的去修饰酶抑制剂。

2）富集靶标蛋白

①选择合适的裂解液。

②超声破碎处理。

3）低温环境

①样本在制备过程中，始终置于冰上。

4）蛋白变性

①蛋白95℃变性5-10min。

②多次跨膜蛋白，建议不煮样。

5）浓度测定

①通过Bradfard分析、Lowry分析或BCA分析测定样本蛋白浓度。

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