A covalent PIN1 inhibitor selectively targets cancer cells by a dual mechanism of action

Nat. Commun. 8, 15772 doi: 10.1038/ncomms15772 (2017)

关键字：药筛，流式细胞仪，Celesta，活性氧

概述：脯氨酰异构酶 （PIN1）是多种信号通路的关键修饰因子，在大多数癌症中都有过表达，并且是多种癌症通路的调节器（如：c-MYC, NOTCH1, WNT/b-catenin and RAS/MEK/ERK pathways）其活性对肿瘤的发生和发展有重要作用。PIN1功能的失活会抑制肿瘤生长和癌症干细胞的扩展，恢复癌症化疗敏感性并阻止转移扩散，以上原因为基于抑制PIN1活性的治疗策略提供了理论基础。但是目前仍然缺少有效的PIN1抑制剂作为抗癌药物。文章中经过药物筛选，发现了一种新的共价PIN1抑制剂-KPT-6566，能够选择性地抑制PIN1并将其作为降解的靶点。文中表明了KPT-6566的作用机制为共价结合到PIN1的催化位点，导致一种类似醌的药物的释放，产生活性氧和DNA损伤，进而导致癌细胞死亡。KPT-6566的体外治疗影响了了PIN1依赖的癌症表型并且在体内治疗中降低了肺转移的发生。现在就请跟着小编从流式细胞仪的应用的视角浅析下本文吧。

细胞表型鉴定：CD44/CD24/EpCAM（仪器：FACSCelesta）

细胞活性氧检测： 5 mM终浓度CellROX Green（仪器：FACSCelesta）

凋亡实验：Annexin V/Propidium Iodide（仪器：Calibur）

流式数据分析：FlowJo software