瑞替加滨（retigabine，RTG）是一种作用于中枢神经系统的钾离子通道开放剂，能够改善急性应激所导致的空间记忆障碍，本研究采用长期反复低温水浸束缚方法建立大鼠慢性应激模型，通过观察RTG对慢性应激抑郁样大鼠和正常成年大鼠的行为学，以评价RTG的抗抑郁症状的有效性。
一、材料与方法
1 药物和试剂
瑞替加滨（上海麦克林生化科技有限公司，规格:250mg，纯度:98%）
2 仪器
SuperMaze+高通量动物行为实验分析软件（上海欣软信息科技有限公司）；SuperFst高通量强迫游泳实验软件（上海欣软信息科技有限公司）。
3 动物分组与给药
方法成年雌性SD大鼠32只，35～42d，体质量180～220g。实验动物饲养于专用的动物房，饲养环境恒定温度为23℃、湿度为60%，保持光照／黑暗12ｈ恒定循环，自由饮水和摄食。SD大鼠随机分为正常组、模型组、RTG高剂量组（4mg·kg-1）和RTG低剂量组（2mg·kg-1），每组8只，适应性饲养1周后开始实验。RTG用含1%吐温80的生理盐水配成浓度为0.8mg·mL-1的溶剂进行腹腔注射。
4 慢性应激模型建立
使用自制大鼠固定器，固定大鼠于狭小空间中，限制其自由活动。正常组大鼠腹腔注射生理盐水但不给予应激刺激；RTG处理组大鼠于每天应激前1ｈ腹腔注射药物，随后与模型组大鼠一起束缚合并冷水浸泡应激，持续8ｈ，连续21ｄ。应激结束后，烘干回笼。每天应激刺激时间统一在9:00～17:00。
5 行为学检测
5.1 旷场实验
将大鼠放置于敞箱中心格内（敞箱大小100cm×100cm×40cm，敞箱内壁为黑色，底面平均分为25格），大鼠在敞箱内自由活动5min，录像记录下运动轨迹，分析其总运动距离，平均运动速度以及在中央区域停留的时间。每只大鼠结束测量后，均用７5%乙醇彻底清洁敞箱。
5.2 强迫游泳实验
将大鼠单独放入玻璃水缸中（直径25cm、高45cm、水深30cm），水温为（25±1）℃，游泳5miｎ，记录大鼠静止不动时间（大鼠停止挣扎，仅靠四肢轻微活动漂浮在水上的时间）。
5.3 糖水偏好实验
实验分3ｄ进行，ｄ1给予每组大鼠2瓶相同的1%蔗糖溶液，自由饮用。ｄ2替换成1瓶1%蔗糖溶液和1瓶纯水，自由饮用。禁水禁食12ｈ后，将大鼠单笼放置，给予1%蔗糖溶液、纯水各1瓶，中途互换位置1次，4ｈ后测量计算糖水偏好度:糖水偏好度＝（蔗糖水消耗量）／（蔗糖消耗量＋纯水消耗量）×100%。
6 统计学分析
所有数据用SPSS22.0软件进行统计分析，多组间数据比较运用单因素方差分析，数据均采用ｘ±s表示，图表用GraphpadPrism5.0绘制展示，组间比较，P<0.05视为差异有统计学意义。
二、行为学测试结果
在旷场实验中，相对于正常组，模型组大鼠活动总路程、平均运动速度以及中央区域停留时间明显下降；与模型组相比，RTG干预后大鼠活动总路程、平均运动速度以及中央区域停留时间均显著上升，抑郁样症状得到改善。
在强迫游泳实验中，模型组大鼠较正常组在强迫游泳中不动的时间显著延长，且具有统计学差异；与模型组比较，RTG处理组均明显缩短大鼠不动时间，表明抑郁症状得到缓解。
在糖水偏好实验中，与正常组相比，模型组大鼠对糖水的偏爱程度显著降低；与模型组比较，RTG干预后，大鼠糖水偏好程度增加，具有统计学差异，结果见表1。表明RTG能改善慢性应激引起的快感缺失大鼠的抑郁样状态。
综上所述，本研究采用低温水浸束缚方法建立大鼠慢性应激模型，诱导大鼠抑郁样症状并损伤海马结构及其可塑性。 一定剂量的RTG能有效防治应激性抑郁样症状。
