单细胞3'文库和5'文库的区别


单细胞测序方法和原理系列:


单细胞3'文库的捕获磁珠:尾部是Poly(dT)VN,直接和mRNA的polyA尾结合

酶切片段化之后得到的是端3‘片段(barcode和UMI序列放在3'端

参考:单细胞转录组建库原理:SMART、TargetAmp和10X genomics

单细胞5'文库的捕获磁珠:尾部是TSO

mRNA先被Poly-dT捕获后合成末端带CCC的序列

CCC序列再与TSO尾端的rGrGrG序列结合(barcode和UMI序列放在5'端

参考:单细胞免疫组库:TCR基因重排原理和TCR测序建库方法

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