LIBRA-seq:快速开发单克隆抗体的单细胞技术


单细胞测序方法和原理系列:


1. 文章

LIBRA-seqs全称Linking B cell Receptor to Antigen specificity through sequencing,意思是通过测序将B细胞受体与抗体特异性连接。
这项技术的方法学的文章在2017年发表在cell上。

特点:

2. 方法原理
  • 2.1 对抗原加标签
    在抗原上连接上PE燃料,用于流式分选,连接上特定DNA条码,用于测序。(这里的抗原就像鱼饵,每种鱼饵可以抓特定的鱼。给鱼饵加上标签,就可以知道抓到的是什么鱼)
  • 2.2 把外周血单核细胞与抗原孵育
  • 2.3 流式细胞仪分离带荧光的细胞
  • 2.4 通过10x仪器,把细胞分离再测序
  • 2.5 经过基因重组表达,得到目标抗体
3. LIBRA-seq优点

传统方法:杂交瘤技术和噬菌体展示技术
和传统方法相比,LIBRA-seq具有如下优点:

    1. 速度快
    1. 可用于被感染过的,有免疫力的人的外周血
    1. 一次性得到目标抗原、抗体 轻重链的全场序列
    1. 可以一次实验筛选多个抗原
    1. LIBRA-seq得分直接显示了抗体的结合特异性
3. 小结
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