NanoTag-FluoTag-Q抗TagFP AbberiorStar635P,激发更明亮的信号

FluoTag-Q抗TagFP是一种内部开发的单域抗体(sdAb),对来自四膜虫(Entacmaea quadricolor)的荧光蛋白(包括TagRFP、TagRFP657、TagBFP、mTagBFP2、mKate和mKate2)具有高亲和力和特异性。它每个sdAb分子上结合一个荧光团,可用于更定量的测量(Q)。

荧光蛋白(FPs)在细胞生物学和显微镜技术中被广泛用作蛋白标签,彻底革新了蛋白成像和生化应用。TagRFP是一种单体红色荧光蛋白,由TurboRFP(来自四膜虫)改造而来,具有更长的荧光寿命和增强的光稳定性(Merzlyak等,2007)。通过进一步的突变,这种红色荧光蛋白被改造成了蓝色荧光的TagBFP(Subach等,2008)。几年后,一个改进版本mTagBFP2被推出,提供了更高的亮度和稳定性(Subach等,2011)。2007年,mKate从TagRFP中开发出来,以其出色的远红荧光和光稳定性而闻名(Shcherbo等,2007)。目前可用的最新变体可以在开源的荧光蛋白数据库FPbase上找到。

FluoTag-Q抗TagFP可牢固结合TagRFP、TagRFP657、TagBFP、mTagBFP2、mKate和mKate2。

FluoTags是直接与一定数量的荧光团结合的单域抗体(sdAbs)。FluoTag-Q是配备单个荧光团的sdAb,用于更定量的读数。FluoTag-X2每个sdAb携带两个荧光团。FluoTag-X4是两种不同的sdAbs的混合物,它们同时结合到单一目标上,每个都带有两个荧光团,从而总共在目标蛋白上装饰4个荧光团,以产生更明亮的信号。

 

艾美捷FluoTag-Q抗TagFP AbberiorStar635P

货号:N0501-Ab635P-L

克隆:1H7

宿主:羊驼

生产于:大肠杆菌

应用:免疫荧光

注意:不建议在Western blot中使用该产品,因为sdAbs主要识别天然/折叠蛋白。

稀释度:1:1000(相当于最终浓度为5 nM)

靶标:TagFP

特异性:识别TagRFP、TagRFP657、TagBFP、mTagBFP2、mKate和mKate2。可能与其他未经测试的TagRFP衍生物发生反应。

配方:从含有2% BSA(美国产地)的pH 7.4的PBS中冻干sdAb克隆。用200 ul去离子水中的50%甘油复溶。如果适用,我们建议加入0.1%叠氮化钠作为防腐剂。复溶于200 ul时,单域抗体的最终浓度为5 uM。

运输:常温

储存:含有冻干蛋白的安瓿瓶可在4°C下储存6个月。我们建议用去离子水中的50%无菌甘油复溶蛋白,并加入0.1%叠氮化钠作为防腐剂(如果适用)。通过分装复溶蛋白,减少冻融循环次数。长期储存可在-80°C下保存长达6个月。工作分装可在-20°C下保存长达4周。不建议将复溶后的蛋白在4°C下储存。

注意:仅用于体外/研究目的。无毒、无害、无传染性。

使用FluoTag-Q Abberior STAR635P抗TagFP sdAb(货号N0501,稀释度1:500)对表达TOM70-BFP报告蛋白的PFA固定3T3细胞进行免疫染色。BFP信号以蓝色表示,相应的FluoTag信号以黄色表示,两个通道的合并以白色表示。

 

文献参考:

Oleksiievets N, Sargsyan Y, Thiele JC, et al. Fluorescence lifetime DNA-PAINT for multiplexed super-resolution imaging of cells. Commun Biol. 2022;5(1):38. Published 2022 Jan 11. doi:10.1038/s42003-021-02976-4 (FL-DNA PAINT)

Thiele JC, Helmerich DA, Oleksiievets N, et al. Confocal Fluorescence-Lifetime Single-Molecule Localization Microscopy. ACS Nano. 2020;14(10):14190-14200. doi:10.1021/acsnano.0c07322 (DNA PAINT)

Sograte-Idrissi S, Oleksiievets N, Isbaner S, et al. Nanobody Detection of Standard Fluorescent Proteins Enables Multi-Target DNA-PAINT with High Resolution and Minimal Displacement Errors. Cells. 2019;8(1):48. Published 2019 Jan 14. doi:10.3390/cells8010048 (DNA PAINT)


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