问题1:细胞换液操作问题。
昨天对之前接种的细胞进行换液,换液后2号老师过来了,观察我拍到的照片。于是有了下面一段对话。
老师:“你这个照片里头怎么还有死细胞啊,是不是没洗干净啊。”
我:"没洗干净?可能是用PBS洗的时候,那个废液没办法完全洗干净吧,用枪头吸出废液的时候,因为培养瓶会有点别着,总是会残留一点在培养瓶里头,小彭老师也说是没法完全吸干净的,好像是会残留一点点死细胞的,我以为是正常的。"
老师(看了我一眼,有点诧异):"废液你还用枪头吸啊?"
我:“不,不然呢?我一直都是用枪头吸出来的啊(懵逼脸)”
老师(忍不住笑了):“直接倒啊。”
我:“····对哦,真是傻我”
老师还笑着安慰了一下,“没事,下次就有经验了。”
我:谢谢哦,真有被安慰到。
是啊,直接倒,真是平地一声雷。感觉自己真的是傻极了,明明很简单的操作,在老师提出之前就是想不到。现在想想,有些事还是得灵活处理,不能太死板了。
问题2:培养温度37℃和39℃对细胞培养状态的影响?
从2022.8.5—2022.8.8,是在39℃下培养的,生长状态良好,密度约在40%-50%。从2022.8.8观察了细胞状态之后,由于培养箱原因,换到了37℃下培养,到今天过去了一天,细胞状态感觉没有什么变化,密度也看不出变化,后面继续观察。
据厂家提供的培养配方上面显示,细胞最佳培养温度在39℃,但是根据论文数据显示,大多是在37℃下培养。我初步推测,可能原因是:37℃虽然不是最佳温度,但是也能让该细胞正常生长,因为实验室培养细胞大多培养温度都是37℃,为了方便也就放在37℃一起培养了。但我2号老师并不认可我的想法,但是因为小培养箱在细胞间外面不是很方便,并且有染菌的风险,他同意了我把细胞放在和其他同学公用的细胞间37℃培养箱。后面先培养着,每天观察一下细胞状态再说吧。