ATAC、CUT&tag生物学重复callpeak笔记

表观组数据在call-peak的时候选取的方法还是很多的,这里简单记录一下

1 先call-peak后取peak交集

可以使用 IDR统计一致性较好的peak然后bedtools intersect合并peak

idr 安装参考链接

The IDR (Irreproducible Discovery Rate) framework is a unified approach to measure the reproducibility of findings identified from replicate experiments and provide highly stable thresholds based on reproducibility.

例子

echo "idr --samples A${id}K4_peaks.broadPeak C${id}K4_peaks.broadPeak --input-file-type broadPeak --output-file ACK4-${id}  --plot --rank p.value  ">>ACK4.sh
#得到图片还有一致性peak文件
iTerm2.VbLrJw.ACK4-69.png
NC_045731.1     18482515        18484118        .       1000    .       -1      261.55000       -1      5.000000        5.000000        18482520        18483972        261.55000       18482515        18484118        677.33400
NW_022587827.1  45181   47485   .       1000    .       -1      177.63400       -1      5.000000        5.000000        45181   46596   177.63400       45193   47485   414.37100
NC_045731.1     18515047        18516017        .       1000    .       -1      134.81900       -1      5.000000        5.000000        18515068        18515901        134.81900       18515047        18516017        391.59900     

一致性较好的peak可以使用bedtools intersect合并

image.png
bedtools intersect [OPTIONS] -a <FILE> \
                             -b <FILE1, FILE2, ..., FILEN>

2先合并bam文件后callpeak

首先对于生物学重复bam使用deeptools的multiBamSummary进行correlations 统计

multiBamSummary computes the read coverages for genomic regions for typically two or more BAM files. The analysis can be performed for the entire genome by running the program in ‘bins’ mode. If you want to count the read coverage for specific regions only, use the BED-file mode instead. The standard output of multiBamSummary is a compressed numpy array (.npz). It can be directly used to calculate and visualize pairwise correlation values between the read coverages using the tool ‘plotCorrelation’. Similarly,

multiBamSummary bins --bamfiles file1.bam file2.bam -o results.npz
##生成的npz文件可以做主成分分析,plotCorrelation分析
plotCorrelation -in x.npz --skipZeros --corMethod pearson --whatToPlot heatmap --colorMap RdYlBu_r --plotNumbers -o x.pdf --outFileCorMatrix x.tab

相关性系数较好的可以进行bam合并

samtools merge [options] -o <out.bam> [options] <in1.bam> ... <inN.bam>
samtools merge [options] <out.bam> <in1.bam> ... <inN.bam>

那种方法好要结合自己的数据测序深度,文库质量而选择,可以先call-peak看看peak数量,idr看看一致性再做决定。

©著作权归作者所有,转载或内容合作请联系作者
  • 序言:七十年代末,一起剥皮案震惊了整个滨河市,随后出现的几起案子,更是在滨河造成了极大的恐慌,老刑警刘岩,带你破解...
    沈念sama阅读 203,456评论 5 477
  • 序言:滨河连续发生了三起死亡事件,死亡现场离奇诡异,居然都是意外死亡,警方通过查阅死者的电脑和手机,发现死者居然都...
    沈念sama阅读 85,370评论 2 381
  • 文/潘晓璐 我一进店门,熙熙楼的掌柜王于贵愁眉苦脸地迎上来,“玉大人,你说我怎么就摊上这事。” “怎么了?”我有些...
    开封第一讲书人阅读 150,337评论 0 337
  • 文/不坏的土叔 我叫张陵,是天一观的道长。 经常有香客问我,道长,这世上最难降的妖魔是什么? 我笑而不...
    开封第一讲书人阅读 54,583评论 1 273
  • 正文 为了忘掉前任,我火速办了婚礼,结果婚礼上,老公的妹妹穿的比我还像新娘。我一直安慰自己,他们只是感情好,可当我...
    茶点故事阅读 63,596评论 5 365
  • 文/花漫 我一把揭开白布。 她就那样静静地躺着,像睡着了一般。 火红的嫁衣衬着肌肤如雪。 梳的纹丝不乱的头发上,一...
    开封第一讲书人阅读 48,572评论 1 281
  • 那天,我揣着相机与录音,去河边找鬼。 笑死,一个胖子当着我的面吹牛,可吹牛的内容都是我干的。 我是一名探鬼主播,决...
    沈念sama阅读 37,936评论 3 395
  • 文/苍兰香墨 我猛地睁开眼,长吁一口气:“原来是场噩梦啊……” “哼!你这毒妇竟也来了?” 一声冷哼从身侧响起,我...
    开封第一讲书人阅读 36,595评论 0 258
  • 序言:老挝万荣一对情侣失踪,失踪者是张志新(化名)和其女友刘颖,没想到半个月后,有当地人在树林里发现了一具尸体,经...
    沈念sama阅读 40,850评论 1 297
  • 正文 独居荒郊野岭守林人离奇死亡,尸身上长有42处带血的脓包…… 初始之章·张勋 以下内容为张勋视角 年9月15日...
    茶点故事阅读 35,601评论 2 321
  • 正文 我和宋清朗相恋三年,在试婚纱的时候发现自己被绿了。 大学时的朋友给我发了我未婚夫和他白月光在一起吃饭的照片。...
    茶点故事阅读 37,685评论 1 329
  • 序言:一个原本活蹦乱跳的男人离奇死亡,死状恐怖,灵堂内的尸体忽然破棺而出,到底是诈尸还是另有隐情,我是刑警宁泽,带...
    沈念sama阅读 33,371评论 4 318
  • 正文 年R本政府宣布,位于F岛的核电站,受9级特大地震影响,放射性物质发生泄漏。R本人自食恶果不足惜,却给世界环境...
    茶点故事阅读 38,951评论 3 307
  • 文/蒙蒙 一、第九天 我趴在偏房一处隐蔽的房顶上张望。 院中可真热闹,春花似锦、人声如沸。这庄子的主人今日做“春日...
    开封第一讲书人阅读 29,934评论 0 19
  • 文/苍兰香墨 我抬头看了看天上的太阳。三九已至,却和暖如春,着一层夹袄步出监牢的瞬间,已是汗流浃背。 一阵脚步声响...
    开封第一讲书人阅读 31,167评论 1 259
  • 我被黑心中介骗来泰国打工, 没想到刚下飞机就差点儿被人妖公主榨干…… 1. 我叫王不留,地道东北人。 一个月前我还...
    沈念sama阅读 43,636评论 2 349
  • 正文 我出身青楼,却偏偏与公主长得像,于是被迫代替她去往敌国和亲。 传闻我的和亲对象是个残疾皇子,可洞房花烛夜当晚...
    茶点故事阅读 42,411评论 2 342

推荐阅读更多精彩内容