大肠杆菌（Escherichia coli），原核生物，细胞简单，培养时间短，是常用的模型生物。
实验室培养大肠杆菌一般使用 LB液体/ 固体培养基，37°c过夜培养。
关于培养基的题目：
1) 琼脂为凝固剂,葡萄糖为碳源,尿素为氮源;
2) 由于只有能合成脲酶的细菌才能在该培养基上生长，可以用来选择出能够合成脲酶的细菌, 在功能上称为选择培养基;
3)由于其化学成分明确,故又称为合成培养基;
4)由于该培养基中存在着有机碳源葡萄糖,故可推测用该培养基培养的细菌为异养细菌。
转基因插入质粒载体，蓝白斑筛选通过特异位点重组的方式进行重组克隆子的筛选。
属于营养缺陷型筛选。
使用的α-半乳糖苷酶缺陷型大肠杆菌菌株基因组中只含有编码C端的部分，产生无活性的酶；表达载体表达的α-肽与酶α-互补后可恢复α-半乳糖苷酶活性。
除基础培养基外，额外加入的试剂有：X-Gal（显色底物），IPTG（诱导物），Amp（抗性筛选），实验室经常称为三件套。
蓝白斑筛选原理
1）若质粒未成功导入，细菌将被抗生素杀死，培养基上无菌落生长；
2）若导入了空载的质粒，细菌获得氨苄青霉素抗性。在诱导物的作用下，α-肽表达，与能分解呈色底物，菌落呈蓝色；
3）若导入了转化的重组质粒，细菌亦可获得氨苄青霉素抗性。目的基因插入多克隆位点后，原本的α-肽失活，不再能分解呈色底物，菌落呈原本的白色，即为所需要的阳性克隆。
