动物组织总RNA提取前期准备
1 试剂盒前期处理：
[if !supportLists]1. [endif]按瓶身标签说明在RPE Solution中加入4倍体积的无水乙醇，混匀后在瓶身做好标记。密封保存。
[if !supportLists]2. [endif]去酶处理：RNase是导致RNA降解最主要的物质，非常稳定。在一些极端的条件可暂时失活，限制因素去除后又迅速复 性。常规的酸、碱以及加热方法不能使RNase完全失活。RNase广泛存在于人的皮肤上和体液及环境中，因此制备RNA 时必须经常更换手套，同时戴上一次性口罩和卫生帽，并保证环境清洁。
[if !supportLists]3. [endif]样品保存：匀浆后，加氯仿前，样品可在-70°C放置一个月以上；提取的RNA样品可以在70%酒精中-20°C保存2个星期以上；如果需要长期保存，请于超低温冰箱中保存。
2 样品前期处理：
[if !supportLists]1. [endif]提前检查离心机、制冰机、PCR仪是否正常工作；提前检查无水乙醇等试剂。去到5楼实验室取借用小推车，危化品柜取氯仿，去到3楼实验室装入碎冰于1号泡沫盒中至大半盒。（7：00-7：20）
[if !supportLists]2. [endif]在612实验室换好实验服，戴好口罩和PE手套。准备好乳胶手套1盒、PE手套1袋、小密封袋1包、纸巾1包备用，记号笔1支，高压灭菌过的枪头2盒（10μl、200μl混装1盒和1ml1盒）以及对应量程的移液枪3把备用，未开封无酶无菌的EP管和PCR管各1袋，UNIQ-10 柱式Trizol 总 RNA 抽提试剂盒（含Trizol试剂、DEPC-ddH2O 1瓶、RPESolution）、氯仿1瓶、无水乙醇1瓶、泡沫盒2个（装液氮和冰块）、试管架1个、保温杯1个、铝盒（含剪刀2把、镊子2把、研磨棒3个）、从液氮罐中倒出一部分液氮到泡沫箱中备用，倒入一部分到保温杯备用（杯身和杯盖均提前泡过depc水）。全部置于小推车中间层备用。
[if !supportLists]3. [endif]将冰袋（可放置2个EP管）架置于冰上预冷备用；手套喷酒精消毒，取出2个1.5ml的无菌无酶的EP管，分别做好标记（瓶盖及瓶身都要做好标记，防止磨损不易识别）置于冰袋上备用；
[if !supportLists]4. [endif]加入500μlTrizol试剂后置于冰上试管架备用，装有冰块的泡沫箱、装有液氮的泡沫箱置于小推车顶层。（7：20-8：00）
[if !supportLists]5. [endif]推着小推车去到1楼，打开离心机4℃预冷，将小推车置于超低温冰箱室。带上乳胶手套，将镊子、剪刀、研磨棒取出放入杯盖中，从保温杯中倒入一部分液氮到保温杯盖预冷。打开泡沫冰盒找到EP管做准备。
[if !supportLists]6. [endif]从-80℃冰箱中迅速取出装有2管样品的冻存管，寻找时迅速将袋子迅速放入备有液氮的泡沫箱中，保持低温寻找到样品管，用预冷镊子剪刀辅助夹取，右手持镊子取出约眼屎大小的样品组织，左手打开装有500μlTrizol 的EP管盖，放入样品。
[if !supportLists]7. [endif]迅速放回剩余样品置超低温冰箱。用预冷研磨棒研磨EP管中样品，此操作于冰上进行。（8：00-8：10）
[if !supportLists]8. [endif]研磨好的样品按照UNIQ-10 柱式Trizol 总 RNA 抽提试剂盒提取RNA。
[if !supportLists]① [endif]离心过程中准备好下一步的EP管并做好标记，并取出4个200μl的无菌无酶的EP管，分别做好标记（瓶盖及瓶身都要做好标记，防止磨损不易识别）置于冰袋上以便后续测浓度使用（8：10-10：30）
[if !supportLists]② [endif]最后一步离心静置过程中，检查好药品：包括UNIQ-10 柱式Trizol 总 RNA 抽提试剂盒（含Trizol试剂、DEPC-ddH2O 1瓶、RPE
Solution）、乙醇氯仿1瓶、无水乙醇1瓶均放入空泡沫箱；1ml枪头及1ml\200μl枪头盒、保温杯1个、铝盒（含剪刀2把、镊子2把、研磨棒3个）也一并放入置于小推车。
[if !supportLists]③ [endif]取出20μlRNA于PCR管中置于冰上备用。余下10μl用密封袋做好标记置于超低温冰箱。
[if !supportLists]④ [endif]回到3楼实验室将10μl枪头、2.5μl枪、样品管、DEPC-treated ddH2O约20μl置于冰上，4个PCR管及PCR板，纸巾1包，去到3楼测RNA浓度。注意：浓度在100-200ng/μl时可以不用调节浓度。
