很多小伙伴是不是对酵母筛选实验里的蓝白斑现象存在些许疑惑呢，为什么加入试剂后会显蓝色？有时候用X-gal，而有时候用X-α-Gal，它们两者之间有什么区别呢？今天我们就来为大家解答清楚这一疑惑。
为了便于同学们快速理解，小源直接将常见的酵母菌株及其对应的系统类型整理成了一张表。
X-Gal 与 X-α-Gal 是酵母双杂交系统中两种常用的显色底物，分别对应不同的报告基因与检测机制。X-Gal是 β-半乳糖苷酶的底物，用于检测由LacZ报告基因编码的 β-半乳糖苷酶，该酶定位于细胞内，可将 X-Gal 水解为不溶性蓝色沉淀，使阳性互作的酵母菌落呈现蓝色。
X-α-Gal则是 α-半乳糖苷酶的特异性底物，用于检测酵母内源MEL1报告基因表达的 α-半乳糖苷酶，该酶可分泌至胞外，将培养基中的 X-α-Gal 分解产生可溶性蓝色色素，使菌落呈现蓝色，具有更高灵敏度与更便捷的使用特点。
一、酵母双杂交一对一验证（核体系）
如图为酵母双杂交核体系的结果图，实验组别pGBKT7-A+pGADT7-B在不同培养基上均能生长，且在含X-α-Gal试剂的缺陷培养基上显蓝色，说明A与B能互作。
X-α-Gal是 α-半乳糖苷酶的特异性底物，用于检测酵母内源MEL1报告基因表达的 α-半乳糖苷酶，MEL1 基因自带分泌信号肽，酵母合成酶之后直接排到胞外，所以
当把 X‑α‑Gal 加入培养基后，酵母菌落正在生长，且酶被分泌出来，酶与X‑α‑Gal接触后，菌落直接变蓝。
携带MEL1基因的酵母菌株包括：Y2HGold、Y190、AH109、Y187等。
酵母双杂交一对一验证（核体系）
二、酵母双杂交一对一验证（膜体系）
如图为酵母双杂交膜体系的结果图，实验组别pBT3-X-A+pPR3-N-B在不同培养基上均能生长，且在含X-Gal试剂的缺陷培养基上显蓝色，说明A与B能互作。
X-Gal是 β-半乳糖苷酶的底物，用于检测由LacZ报告基因编码的 β-半乳糖苷酶，该酶是胞内酶，它被细胞膜包着，不会分泌到培养基里，所以必须做裂解菌体，酵母菌破壁后，酶才能出来接触底物显色，进而使阳性互作的酵母菌落呈现蓝色。
携带Lacz基因的酵母菌株包括：AH109、Y187、Y190、PJ69-2A、CG-1945、SFY526、NMY51（膜系统专用）等。
酵母双杂交一对一验证（膜体系）
