氢气抑制肺癌的细胞学
1、细胞免疫荧光观察
方法：收集对数生长期的A549细胞，计数，用全血清培养基稀释细胞悬液至5x10＊1mL，接种于6孔板的细胞玻片上。置于CO，细胞培养箱中培养24小时，根据实验分组每孔更换普通培养基或者含氢培养基，继续培养24小时。加入稀释的anti-Vimentin抗体（空白对照加入PBS，实验组加人抗体），再加人稀释的荧光二抗，加Hoechst进行核染色。取出细胞玻片，荧光显微镜下观察、拍照。
结果：本实验提示氢分子对A549细胞生长的作用。与普通培养基培养的对照组相比，氢分子处理后，癌细胞株生长变缓慢。由第1代到第10代中的红色荧光（BrdU染色）明显减少，表明氢气抑制细胞的生长。
2、A549细胞周期检测
方法：收集对数生长期的细胞，计数，用全血清培养基稀释细胞悬液至2x105／mL，接种于6孔板中。置于CO2的细胞培养箱中培养24小时，根据分组每孔换成普通培养基或者含氢培养基，继续培养24小时。取出固定后的细胞，离心，去掉固定液，加入200微升细胞周期检测试剂，流式检测。
结果：如图7所示，与普通培养基培养相比，氢气处理的A549细胞的S期细胞数量显著减少，G2／M期细胞显著增加，提示氢可能通过减少S期分裂以及G2／M期阻滞，影响细胞周期，抑制癌细胞增殖，促进细胞的凋亡。
02.正常组和吸氢组数据
3、细胞迁移观察
方法：采用细胞划痕试验。取对数期生长的细胞，消化后计数，在含5％CO2饱和湿度的培养箱中培养，待细胞长满板底后，用200微升的黄枪头垂直于孔板沿直线制造细胞划痕，尽量使每个划痕的宽度一致。分组加入1％FBS的普通培养基和含氢培养基，将培养板放人培养箱中继续培养，在划痕后的0、24小时拍照记录。缩时录像0至24小时的细胞迁移的情况，观察氢对肿瘤细胞迁移能力的影响。
结果：经过24小时的培养，细胞开始向中间移动，加入氢培养基后，A549癌细胞的迁移能力显著降低。
4、结论
本实验从细胞增殖、细胞成瘤、细胞活性、细胞周期和凋亡、细胞转移侵袭等方面，测试了上海滤美公司生产的氢氧气雾化机制备的氢氧混合气体对人类肺腺癌细胞A549的作用效果，结果显示氢气能显著改变肿瘤细胞形态，改变细胞周期，促进凋亡，抑制肿瘤细胞生长、运动、侵袭和迁移。
文章来源：《氢气控癌：理论和实践》
