在分子检测过程中，发现甲状腺乳头状癌的发病年龄出现年轻化。饮食因素和环境因素可能是导致其高发的外部原因。
甲状腺乳头状癌是当前发病率最高的一类甲状腺癌（约占80%），其中Braf V600E突变是其常见的突变位点，该位点的分子检测在临床甲状腺癌中起到辅助诊断的作用，并提示预后不良。
一. Braf基因简介
Braf基因编码细胞中丝/苏氨基酸特异性激酶，与细胞的生长、分化、凋亡等细胞生命过程密切相关。在多种肿瘤中Braf被发现作为致癌基因发挥作用，包括非霍奇金淋巴瘤，结直肠癌，甲状腺癌，非小细胞肺癌等。
Braf是EGFR信号通路上的信号转导因子，其基因组上的突变位置发生在7号染色体15外显子1799位核苷酸上（T->A，T1799A），对应到氨基酸序列的第600位密码子上（V：缬氨酸->E：谷氨酸）。当发生基因突变时，Braf激酶活性被持续激活，导致其参与的信号通路处于异常激活状态，造成细胞功能异常，这是Braf基因突变致癌的分子机制。
二. Braf分子检测
样本要求：超声引导下的细针穿刺，细胞涂片，细胞量>20~30个；或石蜡组织样本。
分子实验前的病理预判断：巴氏染色（为主）或HE染色，细胞核异型性增加，呈毛玻璃状，核内有明显包涵体和核沟，伴有砂粒体，细胞呈乳头状生长。
细胞收集方法：电子显微镜下画出待检测位置，使用加热垫化胶，撕下盖膜后，使用二甲苯脱胶三次，每次使用加热垫挥发二甲苯，使用无水乙醇洗掉玻片上残留的二甲苯，加热垫上挥发乙醇。
DNA提取方法：生物安全柜中使用沾有buffer液的刮刀，刮取对应位置的细胞，转移至1.5mL EP管中，加入蛋白酶K，56℃水浴锅中孵育过夜。第二天按照提取说明书的细胞/组织DNA提取步骤，完成后续DNA提取工作。测定DNA浓度。
检测方法：采用qPCR荧光定量的方法进行Braf突变基因检测。每个样本分为Braf组和内参组，分别加入对应的qPCR引物（V600E引物的3'端设置在突变碱基序列的前一个核苷酸位置），加入qPCR Mix后，封口，混匀，除气泡，离心，上机。
试剂性能验证：每次入库新批次的检测试剂，需进行试剂性能验证。选择之前已完成qPCR检测的样本，包括阴性样本1例，弱阳性样本1例，使用新试剂再次上机检测。通过结果的阴、阳性及ΔCT接近程度，判断试剂性能。
三. Braf检测下机数据结果判读
1. 阴、阳性结果判读
阴性对照样本检测结果为阴，峰线无起伏；阳性对照样本检测结果为阳，目的基因峰线起伏明显且内参CT value < 32时，进行样本检测结果判读。Braf mut CT< 36, ΔCT（Braf mut CT - 内参CT） < 7时，结果为阳性，即存在Braf V600E突变基因；Braf mut CT为"Undetect", 结果为阴性；Braf mut CT>36 或 ΔCT (Braf mut CT - 内参CT ) > 7时，样本需复检。
2. PCR结果与免疫组化结果一致率评价
定期汇总比较PCR检测结果和免疫组织化学结果的一致率。通过四格表方式统计结果，分析结果不一致的原因。主要原因：1.肿瘤本身的异质性；2.超声引导下的细针穿刺位置和手术标本位置不同。
