HK-2细胞(人肾小管上皮细胞)培养注意事项

  细胞名称:HK-2(人肾小管上皮细胞)

  细胞别称:Hk-2;HK2;Human Kidney-2

  细胞货号:SNL-165

  生长特性:贴壁

  培养条件:DMEM/F12+10%FBS+1%P/S

  培养环境:空气,95%;二氧化碳(CO2),5%;37℃

  细胞简介:HK-2细胞属源于正常肾的近曲小管细胞,通过导入HPV-16 E6/E7基因而获得永生化。将含有HPV-16 E6/E7基因的重组的逆转录病毒载体pLXSN 16 E6/E7转染外生包装细胞Psi-2;Psi-2细胞产生的病毒再去感染兼嗜性包装细胞系PA317,最后将PA317细胞产生的病毒颗粒导入正常的肾皮质近曲小管细胞。尽管pLXSN 16 E6/E7中含有新霉素抗性,但未用G418筛选转导克隆。Southern和FISH分析显示,HK-2细胞来源于单克隆。PCR检测证实,HK-2细胞基因组中含有E6/E7基因。HK-2细胞保留了指示分化良好的PTCs的表型,细胞碱性磷酸酶、γ-谷氨酰转肽酶、亮氨酸氨基肽酶、酸性磷酸酶、细胞角蛋白、α3、β1整合素和纤维连接蛋白呈阳性,因子VIII相关抗原、6.19抗原和CALLA内肽酶呈阴性。HK-2细胞还保留了近端肾小管上皮的功能特征,如Na+依赖性/根皮苷敏感性糖转运和腺苷酸环化酶对甲状旁腺的反应性,但对抗利尿激素的反应性。HK-2细胞能够进行糖异生,其制造和储存糖原的能力证明了这一点。HK-2细胞是贴壁依赖性的,不会在甲基纤维素、软琼脂或悬浮液中生长。HK-2细胞可以重现用新鲜分离的PTC获得的实验结果。HK-2细胞在毒理学研究中有应用。

  HK-2细胞培养注意事项

  1细胞内有空泡:培养时可见部分细胞的胞质内存在空泡,这是该细胞正常的生理活动,不影响生长,无需担心。

  2细胞生长速度偏慢:注意控制传代密度不要过低,否则生长速度会极慢。推荐传代比例1:2-1:4(具体情况视细胞生长速度及密度决定)。

  3黑点较多:该细胞培养时背景中可能有黑点,为细胞代谢产物和细胞碎片,不影响细胞生长。若黑点较多可以通过PBS润洗或换液清除。如果黑点较多同时出现细胞变形、大量死亡或不生长的情况,应该考虑操作不当导致细胞受损或者存在支原体污染。

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