听说你想研究巨噬细胞极化? - 知乎 (zhihu.com)
人THP-1细胞向M1、M2极化的诱导
(1)使用生长旺盛的THP-1悬浮细胞进行铺板,添加PMA(终浓度100 ng/mL)诱导其向成熟巨噬细胞分化,培养48h后细胞完全贴壁,从悬浮状态变为贴壁细胞;
(2)M1型极化诱导:添加LPS(终浓度100 ng/mL)刺激24h诱导其向M1极化;
(3)M2型极化诱导:添加IL-4(终浓度20 ng/mL)+ IL-13(终浓度20 ng/mL)刺激24h诱导其向M2极化;
(4)可采用qPCR、Western Blot、ELISA和流式检测等方法检测极化后的M1和M2型巨噬细胞标志物,可参考表1。
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巨噬细胞极化的作用
巨噬细胞通常存在于两个不同的亚群:
- 经典激活或M1巨噬细胞,它们是促炎细胞,并被脂多糖(LPS)单独或与Th1细胞因子(如IFN-γ,GM-CSF)联合极化,并产生促炎细胞因子,如白细胞介素-1β (IL-1β), IL-6, IL-12, IL-23和TNF-α;
- 交替激活或M2型巨噬细胞,具有抗炎和免疫调节作用,被Th2细胞因子IL-4和IL-13极化,产生IL-10和TGF-β等抗炎细胞因子。(PMID:29319160)
- M1和M2巨噬细胞具有不同的功能和转录谱。它们具有摧毁病原体或修复炎症相关损伤的独特能力。众所周知,M1/M2巨噬细胞平衡极化决定着器官在炎症或损伤中的命运。当感染或炎症严重到足以影响一个器官时,巨噬细胞首先表现出M1表型,释放TNF-α, IL-1β, IL-12和IL-23对抗刺激。但是,如果M1期继续,就会造成组织损伤。因此,M2巨噬细胞分泌大量IL-10和TGF-β抑制炎症,有助于组织修复、重塑、血管新生和保持稳态。