在进行Western Blot实验时,最令人苦恼的莫过于当两个目标蛋白的条带位置过于接近,导致剪膜后曝光亮度难以统一。尽管精心调整了曝光时间、上样量以及凝胶浓度,但由于分子量相近,剪膜时难免误伤,实验重复多次,既耗时又费力,却始终无法彻底解决这一问题。
如今,情况更是每况愈下!Western Blot图像已成为数据造假的重灾区。2024年,多部期刊纷纷出台新规,加强对图像真实性的审核。
其中,著名的临床医学期刊JCI(Journal of Clinical Investigation)及其子刊JCI Insight明确要求,提交的含剪裁的Blot/Gel图像必须包含所有裁剪印迹和未编辑的凝胶图像文件,并需在图中标注“图[X]的完整未编辑Blot/Gel”及对应通道。
同样,Science期刊也为了打击数据图片造假,宣布今年将采用AI驱动的“Proofig”工具来检测其旗下六种期刊中的图像更改情况。目前,已有数十种期刊明确要求作者提交未裁剪的原始数据图片作为补充数据,否则将面临拒稿的风险。
为避免大家误入歧途,特此整理了期刊、出版集团及学术组织对Blot/Gel图片的相关要求,建议大家在实验开始或投稿前务必了解这些规定,以降低被拒稿的风险。
面对众多期刊、出版社及学术组织对未剪裁、未修改的Western Blot图片日益严格的要求,如何确保研究符合标准,避免因剪膜而导致的拒稿风险甚至被质疑造假,是研究者们面临的重要挑战。
荧光Western Blot技术以其独特的优势,提供了一种高效的解决方案。通过在同一张膜上使用两种不同的荧光二抗分别标记并检测两种目标蛋白,该技术彻底摒弃了传统Western Blot中剪膜的繁琐步骤,有效避免了因剪膜导致的图像问题,如曝光亮度不均、图像不完整等。
为了应对顶级期刊如Nature、Diabetes等对高清晰度、高分辨率实验图像的要求,Bio-Rad推出了ChemiDoc Go荧光及化学发光成像系统。该系统集多功能于一体,包括核酸胶成像、蛋白胶成像、化学发光、Stain-Free免染技术及双通道荧光成像,专为紧凑实验室设计,节省空间的同时满足多样实验需求。其2000万像素的高分辨率和卓越的光学系统,确保图像细节清晰可见,提升实验数据的解析力。ChemiDoc Go的双通道荧光成像功能完美支持多重荧光Western Blot实验,轻松应对分子量相近蛋白的共检测难题。